ESTUDIO DE LA RESPUESTA INMUNE INDUCIDA POR VACUNAS DE EMERGENCIA CONTRA EL VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA.

V. QUATTROCCHI,; S. PAPPALARDO,; V. OLIVERA,; C. LANGELLOTTI,; M. VERMEULEN,; C. MONGINI,; C. WALDNER,; P. ZAMORANO

Cordoba, Argentina

Congreso; SAV 2006; 2006

La Fiebre Aftosa (FA) es una enfermedad aguda, muy contagiosa y económicamente importante, que afecta a animales de pezuña hendida. Cuando surge un foco de infección es necesario vacunar en anillo al ganado circundante para evitar que el virus se disperse. Para esto se necesita una vacuna capaz de inducir protección temprana. En el presente trabajo se resume el desarrollo de vacunas de emergencia, en modelo murino y en bovinos, utilizando adyuvantes acuosos y oleosos y virus aftoso inactivo del serotipo O1 Campos, y el estudio de la respuesta inmune inducida en el modelo murino. La dosis de virus inactivo para la formulación de las vacunas fue testeada en el modelo murino a 4 y 7 días post vacunación. Se escogió la dosis que produjo baja protección frente al desafío viral en ambas fechas. También utilizando este modelo se seleccionaron los adyuvantes ESSAI IMS D 12802 PR ( IMS 802), Montanide ISA IMS1313 N ( IMS 1313) y Montanide ISA 206 (ISA206) (Seppic) para formular las vacunas. Las vacunas formuladas con IMS 802 y IMS 1313 fueron evaluadas en desafío viral por contacto, en bovinos, utilizando cerdos infectados experimentalmente.  En el grupo que recibió la vacuna con IMS802 mas 20 mg de virus inactivo, los niveles de protección fueron de 60% a los 14 dpv, 100% a los 7 dpv y 100% a los 4 dpv. Cuando la vacuna fue formulada utilizando IMS1313 mas virus inactivo, los niveles de protección fueron de 60% a los 7 dpv y de 20% a los 4 dpv. En esta experiencia la protección inducida por el virus inactivo fue de 33.33% a los 7 dpv. El adyuvante ISA206 no fue probado en bovinos. Con el fin de dilucidar los mecanismos involucrados en la protección temprana en el modelo murino, se estudió la respuesta inmune inducida por las distintas formulaciones y por el virus inactivo. Ratones eutímicos y atímicos fueron vacunados y se evaluó el perfil isotípico y la actividad seroneutralizante de los sueros a los 4 y 7 días post inmunización. Se observó que la respuesta humoral inducida en ambos tipos de ratones aumenta luego de la inclusión del adyuvante IMS802 en la vacuna, respecto del grupo que recibió solo virus inactivo. Para conocer qué poblaciones celulares están involucradas en la protección temprana y debido a que la inoculación de las vacunas se realiza por vía intraperitoneal, se extrajeron células de esta zona luego de la inoculación de los adyuvantes y se estudiaron por citometría de flujo. Se pudieron observar diferencias significativas en los dot plots obtenidos cuando se comparó a ratones mock vacunados y ratones inoculados con los adyuvantes ISA206 e IMS802. Las poblaciones analizadas incluyen CD4+, CD8+, B220+ y CD94+ entre otras. También se procedió al dosaje de citoquinas en lavado peritoneal, ganglio mesentérico y bazo a distintos tiempos post vacunación. Conclusión: Es la primera vez que estos adyuvantes se prueban en la formulación de vacunas de emergencia. El adyuvante acuoso IMS802 formulado con virus O1 Campos inactivo logra elevar la protección a 4 y a 7 dpv tanto en el modelo murino como en bovinos, lo cual lo convierte en un buen candidato para la formulación de vacunas de emergencia. El mecanismo involucrado en dicha protección, en el modelo murino, parecería estar relacionado con los anticuerpos neutralizantes y no depender de respuesta T.