PPARgama y NF-kB están implicados en la modulación de la respuesta inflamatoria cardíaca en un modelo murino de infección aguda por Trypanosoma cruzi

FEDERICO PENAS; GERARDO A. MIRKIN; EUGENIA HOVSEPIAN; MARIA ELENA SALES; GOREN, NORA

Mar del Plata

Congreso; IX congrso Argentino de protozoologia y Enfermedades parasitarias; 2011

Sociedad Argentina de Parasitologia

  La enfermedad de Chagas es consecuencia de la infección con Trypanosoma cruzi (Tc). La fase aguda de esta patología se caracteriza por la invasión del parásito a distintos tejidos, entre ellos el cardíaco, promoviendo el desarrollo de procesos inflamatorios agudos. 15-Deoxy-∆12,14 PGJ2 (15d), ligando natural de PPARg, ha sido implicado en la regulación de la inflamación. El objetivo de este trabajo fue analizar la regulación de la respuesta inflamatoria cardíaca por parte de 15d, en un modelo murino de infección aguda con la cepa RA de Tc. Determinamos la expresión de NOS2 mediante Western blot (Wb) y el aumento de citoquinas pro-inflamatorias (IL-6 y TNF-a) mediante Q-RT-PCR en los corazones de los ratones infectados. La expresión de NOS2, IL-6 y TNF-a fue inhibida luego del tratamiento con 1mg/Kg. de 15d. Además, se determinó un aumento en la expresión y actividad de MMP-2 en suero de ratones infectados, mediante Wb y zimografía respectivamente. El tratamiento con 15d también inhibió tanto la expresión como la actividad de MMP-2. Por otra parte, en cortes histológicos de corazones de ratones infectados y tratados con 15d, no observamos diferencias significativas en el número de nidos por campo respecto a los infectados no tratados. El tratamiento con 15d aumentó la parasitemia sin modificar la sobrevida de los ratones infectados. Al ser pretratados con el antagonista de PPARg, GW9662, 15d inhibió parcialmente la expresión de NOS2 y actividad de MMP-2 en ratones infectados. Por lo cual, nos preguntamos si 15d ejerce sus efectos involucrando además de PPARg, la vía de NF-kB. Al estudiar la activación de esta vía, observamos por Wb la desaparición característica de Ik-Ba a las 24h y 36h post infección (pi). Estos resultados fueron corroborados por el ensayo de Retardo de Movilidad Elecroforética (EMSA), donde se observó unión de p65.p50 al motivo kB del promotor de ratón de NOS2. Sin embargo, mediante ensayos de Wb y EMSA, comprobamos que el tratamiento con 15d impidió el traslado de la subunidad p65.p50 de NF-kB al núcleo a las 48h pi. Concluimos que el tratamiento con 15d actúa como un modulador de la respuesta inflamatoria cardíaca disminuyendo la expresión y actividad de enzimas inflamatorias como NOS2 y MMP-2. Asimismo, constatamos que 15d ejercería sus efectos anti-inflamatorios mediante mecanismos dependientes de PPARg e independientes a través de la vía de NF-kB.