REGULACIÓN AUTÓCRINA Y/O PARÁCRINA DE LA FISIOLOGÍA ADRENAL EN UN MODELO DE DIABETES EXPERIMENTAL EN RATA

REPETTO EM; MARTINEZ CALEJMAN C; ASTORT F; PIROLI GG; CYMERYNG CB

Mendoza

Congreso; XV CONGRESO ARGENTINO DE DIABETES; 2006

Sociedad Argentina de Diabetes

Diversos estudios han implicado a los sistemas de óxido nítrico y de hemo oxigensa (HO) en la generación de las complicaciones a largo plazo asociadas con la diabetes. En particular, se ha demostrado que la diabetes involucra alteraciones en la síntesis y liberación de corticosterona atribuidas inicialmente a un deficiente feedback negativo. En el presente estudio se evaluó la función esteroidogénica y los sistemas de óxido nítrico sintasa (NOS) y HO en la corteza adrenal de ratas diabéticas tratadas con estreptozotocina (STZ). METODOLOGÍA: Ratas Wistar macho se trataron con STZ (40 mg/kg/dia, en 3 dosis ip) y se las sacrificó a las 4 semanas. Se utilizó un grupo control (C) y un grupo STZ (ratas cuya glucemia fue >300 mg/dl). Se determinaron los niveles de corticosteronemia en condiciones basales y 60min post-inyección de ACTH (7.5 UI/kg) y se analizó la expresión y actividad de NOS y HO. RESULTADOS: Las ratas con STZ mostraron un incremento de los niveles de ARNm, de proteína y de actividad enzimática de NOS (C: 19.26±0.33; STZ: 66.35±8.64 pmol/min/mg prot, p<0.001vs C). Se observó un aumento de los ARNm para los transportadores de L-Arg  (CAT-2, CD-98 e y+LAT2) en la corteza adrenal del grupo STZ. En coincidencia, células aisladas de la corteza adrenal de las ratas STZ produjeron mayores niveles de nitritos (C: 32.07±0.01; STZ: 50.62±5.24 uM/mg prot.) que las controles. Los animales diabéticos también mostraron alteraciones en el sistema de HO: se detectaron incrementos en la actividad enzimática de HO y en los niveles de ARNm y de proteínas de HO-1. El análisis de parámetros de estrés oxidativo como TBARS indicó una disminución en los animales del grupo STZ (C: 0.225±0.006, STZ: 0.156±0.004 uM/mg prot., p<0.001vs C). Los animales diabéticos presentaron mayor corticosteronemia basal que los controles (C: 13.26±4.69; STZ: 30.90±6.46 ng/ml) pero su capacidad de respuesta a ACTH fue menor que los controles (C+ACTH: 95.78±8.53, p<0.001vs C; STZ+ACTH: 66.35±7.13 ng/ml, p<0.05vs STZ). El tratamiento “in vivo” con el inhibidor de NOS, L-NAME, incrementó la corticosteronemia estimulada por ACTH en los animales diabéticos pero la disminuyó en las ratas controles (STZ+ACTH: 59.09±2.58; STZ+ACTH+L-NAME: 226.19±5.60, p<0.001vs STZ+ACTH; C+ACTH: 281.14±15.28;  C+ACTH+L-NAME: 96.62±13.03 ng/ml, p<0.001vs C+ACTH). En las mismas condiciones el inhibidor de HO, Sn-PPIX no tuvo efecto. CONCLUSIONES: Los resultados demuestran que la diabetes por STZ cursa con un aumento en la actividad de NOS y de los transportadores de L-Arg, en la corteza adrenal. Adicionalmente al efecto del NO en la generación de las complicaciones diabéticas de largo plazo, el incremento en la producción de NO podría modular negativamente la esteroidogénesis adrenal en este grupo de animales. El incremento en los niveles de HO podría asociarse con el efecto citoprotector de esta actividad que se evidencia en los parámetros de estrés oxidativo determinados