Efecto de Fibronectina (Fn) y Anandamida (AEA) durante la capacitación de espermatozoides humanos

MARTÍNEZ, E., OSYCKA-SALUT C., MORALES, P., PÉREZ-MARTÍNEZ S., DÍAZ E.S.

Congreso; XXII Reunión Anual Sociedad de Reproducción y Desarrollo de Chile; 2011

Se sabe que moléculas presentes en el fluido oviductal participan en la regulación de la capacitación espermática dentro del oviducto, y que AEA y Fn son sintetizadas por las células epiteliales oviductales de diferentes mamíferos. Recientemente se ha demostrado que la AEA, en concentraciones nanomolares, induce la capacitación espermática en bovinos. Por otro lado, hemos demostrado que se producen cambios en la exposición de integrinas que unen Fn en la membrana plasmática de los espermatozoides humanos durante la capacitación. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de Fn y AEA durante la capacitación de espermatozoides humanos, y observar si existe interacción entre ambas moléculas. Para ello, alícuotas de espermatozoides móviles, seleccionados por Percoll, fueron capacitados por diferentes tiempos (0, 1, 3, 5 y 18 hrs) en las siguientes condiciones: 1) Medio no capacitante (MNC) 2) Medio capacitante reconstituido (MCR) 3) MCR + Met-AEA 1,4 nM 4) MCR + Fn 100 µg/ml 5) MCR + Met-AEA + Fn. Luego los espermatozoides capacitados fueron evaluados mediante la técnica de Clortetraciclina (CTC). Además, se evaluó el grado de fosforilación de proteínas en residuos de tirosina (p-Tyr) en espermatozoides capacitados por 0, 1 y 5 horas mediante Western blot. Los resultados sugieren que tanto Met-AEA como Fn aumentan la capacitación y el grado de p-Tyr en espermatozoides humanos a partir de la hora cero. Por otro lado, al coincubar Met-AEA y Fn dicho aumento no fue observado, lo que indicaría una modulación negativa de una de las vías sobre la otra.