Mecanismos protectores contra la posible citotoxicidad de CG 10-248, una o-naftoquinona lipofílica en hepatocitos aislados de rata.

PATRICIA CARRIZO; SILVIA FERNÁNDEZ VILLAMIL; MARÍA DEL PILAR MOLINA PORTELA; MARTA DUBIN

Quito

Congreso; XIV Congreso de la Asociación Latinoamericana de Farmacología, IV Congreso Ecuatoriano de Farmacología y Terapéutica y IV Congreso Iberoamericano de Farmacología; 2011

Sociedad Latinoamericana de Farmacologia

  Mecanismos protectores contra la posible citotoxicidad de CG 10-248, una o-naftoquinona lipofílica en hepatocitos aislados de rata. Patricia Carrizo, Silvia Fernández Villamil, María del Pilar Molina Portela y Marta Dubin. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos (CEFYBO). UBA-CONICET. Facultad de Medicina. Paraguay 2155-(1121) Buenos Aires. ARGENTINA La β-lapachona, una o-naftoquinona lipofílica, ejerce sus efectos citotóxicos sobre algunas células tumorales humanas, induciendo apoptosis o necrosis. Uno de sus análogos estructurales, CG 10-248 (CG-NQ), fue estudiada como tripanocida (1,2) y antitumoral (3) . Con el fin de evaluar los posibles efectos citotóxicos de CG-NQ estudiamos su acción sobre diferentes parámetros bioquímicos, en hepatocitos aislados de rata. Los hepatocitos fueron aislados, de ratas alimentadas, de acuerdo con la técnica de Seglen  (4). La viabilidad celular fue determinada por el ensayo de exclusión del azul de Tripán. Los niveles de nucleótidos de piridina se determinaron acorde al método de Bernofsky y Swan (5). GSH y GSSG fueron medidos con el método de Hissin y Hilf (6). La lipoperoxidación fue medida por la formación de malondialdehido,  ensayada por medio de las sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (7). La generación de anión superóxido fue determinada por reducción del citocromo c parcialmente acetilado (8).  Después de incubar los hepatocitos con CG-NQ 100 μM durante 5-15 min, se encontraron los siguientes efectos significativos: (a), disminución en los niveles intracelulares de NAD+, NADH y NADPH; (b) incremento en el contenido de NADP+; (c) disminución en los niveles de GSH y aumento en el contenido de GSSG; (d) inhibición de la peroxidación de lípidos; (e) estímulo en la velocidad de respiración celular y en la producción de anión superóxido. La incubación de hepatocitos con CG-NQ durante, al menos, 1 hora no produjo cambios significativos en la viabilidad celular. La presencia de dicumarol, inhibidor de la DT-diaforasa, incrementó significativamente la pérdida de viabilidad celular en células incubadas con la quinona. Las actividades catalasa y glutatión peroxidasa no fueron modificadas significativamente en estas condiciones experimentales. El aumento observado en la generación de anion superóxido y la producción de peróxido de hidrógeno (especies reactivas del oxígeno), en hepatocitos incubados en presencia de CG-NQ,demostraron la generación de un ciclo redox, en presencia de esta quinona. Los resultados obtenidos indican que las flavoenzimas NAD(P)H quinona óxido-reductasa (DT-diaforasa) y otras NAD(P)H: deshidrogenasas participarían en la vía metabólica para la CG-NQ en hepatocitos aislados. La actividad DT-diaforasa tendría un rol importante en la detoxificación. La existencia de otros mecanismos detoxificantes, incluyendo las reacciones dependientes de GSH, catalasa y glutatión peroxidasa previenen al hepatocito de la citotoxicidad por CG-NQ. Bibliografía:   1-      Ferreira SB, Salomao K,de Carvalho da Silva F, Pinto AV, Kaiser CR, Pinto AC, Ferreira VF, de Castro SL.Eur. J. Méd. Chem. 46:3071-7, 2011. 2-      Pinto AV, de Castro SL. Molecules 10: 4570-90, 2009. 3-      Pardee AB, Li YZ, Li CJ. Curr. Câncer Drug Targets 2:227-235,2002. 4-      Seglen PO. Exp.Cell Res 82:391-398,1973 5-      Bernofsky C, Swan M. Analyt.Biochem. 53:452-458,1973. 6-      Hissin PJ, Hiff R. Anal.Biochem. 74:214-226,1976 7-      Staxey NH, Kappus H. J Toxicol. Environ. Health 9:277-285,1982. 8-      Azzi A, Montecucco C, Richter C. Biochem.Biophys. Res. Commun. 65:597-571,1975