Vías de señalización implicadas en la potenciación muscarínica del efecto del paclitaxel en células MCF-7.

JACOB G,; ESPAÑOL A,; DIEZ RA,; SALES ME

Mar del Plata

Congreso; LV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2010

Sociedad Argentina de investigacion Clinica

La combinación de drogas antitumorales es una posibilidad para mejorar su efecto individual y revertir un problema crítico en la terapéutica tumoral como es la resistencia a las mismas. La óxido nítrico sintasa (NOS) así como el factor nuclear kapa B (NF-kB) son importantes en la tumorigénesis de la glándula mamaria. Se sabe que las drogas anti-tumorales pueden activar la vía de NF-kB e inducir resistencia a su utilización. Previamente demostramos que la activación de receptores muscarínicos (RM) por el agonista carbacol (CARB) o por el citostatico paclitaxel (PTX) en células de un adenocarcinoma mamario humano, MCF-7, inhibe la proliferación con una concentración efectiva máxima de 10-7M y 10-8M (34±2% y 33±3% vs cél. sin tratamiento p<0,001) respectivamente. Utilizando concentraciones sub-umbrales que no tuvieron efecto per se en la proliferación de células MCF-7 ni MCF-10A (línea de mama humana normal) investigamos el efecto de la combinación PTX+CARB sobre la proliferación celular y las vías de señalización activadas durante dicho tratamiento. La proliferación celular se determinó por MTT (% de inhibición respecto de control).Determinamos que la combinación de la concentración sub-umbral de PTX (10-11M) con la de CARB (10-8M) inhibió la proliferación de células tumorales (31±2% p<0,001 vs cél. sin tratamiento) sin modificar la viabilidad de células normales MCF-10A. En células MCF-7 el pre-tratamiento con 4-DAMP (10-7M), antagonista de RM3, NCDC (10-5M), inhibidor de fosfolipasa C (PLC) o L-NMMA (10-4M), inhibidor de NOS, revirtió el efecto de la combinación de PTX+CARB (p<0,001 vs PTX+CARB); mientras que la preincubación con MG-132 (2x10-5M), inhibidor de NF-kB, lo incrementó significativamente (95±6% vs PTX+CARB p<0,001). Concluimos que la asociación de un quimioterápico con un agonista muscarínico aumenta el efecto citotóxico en células tumorales de mama humana vía la activación del RM3 a través de las enzimas PLC y NOS, pudiéndose potenciar dicho efecto bloqueando la activación de NF-kB