CONSTRUCCIÓN Y EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE DE VECTORES EUCARIOTAS QUE CODIFICAN LA POLIPROTEÍNA P12A3C O LA PROTEÍNA VP1 DE AFTOSA JUNTO A MOLÉCULAS COESTIMULADORAS

PEREYRA ERICA; QUATTROCCHI VALERIA; LANGELLOTTI CECILIA; D´ANTUONO ALEJANDRA; MATTION NORA; MONGINI CLAUDIA ; ZAMORANO PATRICIA

Jornada; III Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2010

Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria

El objetivo de este trabajo fue la construcción de plásmidos eucariotas que codifican para la poli-proteína P12A3C y la proteína VP1 del virus de la fiebre aftosa (VFA) O1Campos en combinación o no con las moleculas coestimuladoras CD40L y RANKL; y la evaluación de la respuesta inmune inducida en un modelo murino. Los plásmidos fueron clonados solos o asociados a las moléculas coestimuladora en el vector de expresión pCineo. Estos vectores fueron transfectados a células BHK y se confirmó su expresión in vitro por citometría de flujo y Western Blot. Para examinar su inmunogenicidad, grupos de 5 ratones Balb/c se inocularon dos veces i.d. con las diferentes vacunas génicas y con el control negativo (pCieno). A los 7 días post-booster, se determinaron los anticuerpos anti-VP1 por ELISA. Entre el 40 y 60 % de los animales vacunados con pP12A3C, pVP1 sols o co-inoculados con las moléculas coestimuladoras presentaron título de anticuerpos anti-VP1. Asimismo, para evaluar la protección frente al desafio con el virus, los ratones fueron infectados con 10 4,5 TICD50 de VFA cepa O1/Campos a los 7 días post booster. Encontramos que los ratones inoculados con pP12A3C poseen un mayor grado de protección respecto a los animales vacunados con pVP1 (44% versus 19% para pP12A3C y  pVP1 respectivamente; p<0.027. ANOVA); mientras que el control negativo no fue protegido. Por otro lado, resultados preliminares, indicaron que pP12A3C asociado a las moleculas coestimuladoras inducen una mejor protección que pP12A3C solo. Este trabajo de screening demuestra que las construcciones que expresan la poli-proteína P12A3C provee una mayor protección frente al desafio con el virus respecto a las que poseen la VP1 aun cuando ambos inducen similares titulos de anticuerpo y que la presencia de las moléculas coestimuladoras favorecerían dicha respuesta.