Transcriptos alternativos de SbGAMYB resultan en proteínas normales y truncadas.

RODRIGUEZ MARIA VERONICA; CANTORO, RENATA; BENECH-ARNOLD R.L.

MAR DEL PLATA

Congreso; XXIX REUNION ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL; 2012

SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL (SAFV)

TRANSCRIPTOS ALTERNATIVOS DE SbGAMYB RESULTAN EN PROTEÍNAS NORMALES Y TRUNCADAS Rodríguez M.Verónica1 , Renata Cantoro1 y Roberto L. Benech-Arnold13 1IFEVA (CONICET-UBA) Fac.de Agronomía, UBA. 3Cátedra de Cultivos Industriales, Fac.de Agronomía, UBA. CABA, Argentina. El factor de transcripción GAMYB regula positivamente procesos promovidos por las giberelinas, como degradación del endosperma en semillas, floración y desarrollo normal de anteras. En estudios previos detectamos la presencia de transcriptos alternativos (TA) para SbGAMYB en embriones en granos de sorgo granífero, cuya traducción teórica predice proteínas truncadas que carecen de un dominio terminal (Box3). Para evaluar si estos TA resultan en proteínas truncadas se desarrolló un anticuerpo capaz de detectarlas y distinguirlas por tamaño en un gel SDS-PAGE. Se extrajeron proteínas totales de muestras de embriones de granos inmaduros de sorgo y también de piezas florales (androceo + gineceo) y se analizaron por Western blot. En muestras de flores se observó una forma proteica de tamaño similar al esperado para la forma canónica de GAMYB (~60KDa) mientras que en muestras de embriones se observó una banda de menor tamaño (~50 KDa) correspondiente a una forma truncada de GAMYB. Los niveles de proteína truncada GAMYB-T se mantuvieron elevados durante la incubación y cayeron abruptamente en embriones recién germinados. El gen ortólogo de GAMYB en Arabidopsis thaliana es AtMYB33 y se expresa fuertemente en semillas. Se encontró una variante de splicing alternativo para este gen similar a una de sorgo, RI3 (retención de intrón 3) y que resultaría en una proteína truncada. La sobreexpresión de una variante de splicing de sorgo (EPE3, eliminación parcial de exón 3) en plantas de Arabidopsis generó fenotipos de floración precoz, tamaño reducido de roseta y androesterilidad por indehiscencia. Esto indica que las formas truncadas de GAMYB tienen actividad fisiológica, aunque sería diferente a la de la forma normal.