La efectividad antitumoral de la terapia con el gen interferón-beta se correlaciona con el aumento de oxidantes intracelulares y la caída del potencial mitocondrial

VILLAVERDE, MARCELA S.; GIL CARDEZA, MARÍA L.; ROSSI, ÚRSULA A.; GLIKIN, GERARDO C.; FINOCCHIARO, LILIANA M.E.

Mar del Plata

Congreso; SAIC. LV Reunión Anual; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En nuestro laboratorio demostramos que la lipofección del gen interferon beta humano (hIFNB) complejado con liposomas catiónicos es altamente efectivo en distintas líneas tumorales humanas. Más aún, es efectivo en la línea de melanoma humano, M8, resistente al tratamiento con la proteína recombinante beta (rhIFNB). Con el fin de dilucidar cuáles son los mecanismos diferenciales entre el tratamiento génico y la proteína recombinante comparamos: a) la producción de especies oxidantes (DCDHFDA), b) el potencial mitocondrial (MitotrackerRedCMXRos) y c) la sensibilidad al estrés oxidativo (MTS), en dos líneas tumorales humanas: i) M8 (sensible al hIFNB y resistente a la rhIFNB) y ii) EW7 (sarcoma de Ewing, sensible a ambos tratamientos). Las líneas fueron sembradas en monocapas y i) lipofectadas con el gen Bgal o hIFNB; ii) incubadas con rhIFNB (1000 UI/ml, 1 pulso por día durante 3 días) o iii) incubadas con H2O2 (1-1000 μM). A los 5 días post tratamiento encontramos que la lipofección del gen hIFNB fue capaz de aumentar las especies oxidantes y promover la caída del potencial mitocondrial en ambas líneas mientras que rhIFNB presentó estos efectos en la línea sensible EW7 pero no fue capaz de hacerlo en la línea resistente M8. Por otro lado, EW7 resulto 10 veces más sensible al estrés oxidativo que M8 (EW7IC50:35 μM vs M8IC50:380 μM). Por lo tanto, concluimos que el incremento de las especies oxidantes en paralelo a la caída del potencial mitocondrial serían eventos necesarios para la efectividad del interferón beta. Es probable que, la resistencia al estrés oxidativo sumada a la baja capacidad de rhIFNB de generar una concentración efectiva de oxidantes contribuya a la resistencia observada en M8. En cambio, la transferencia genética, al potenciar mercanismos mitocondriales potenciadores de la apoptosis, ofrecería una estrategia más efectiva que el uso de la proteína recombinante para una neoplasia como el melanoma, altamente resistente a las terapias convencionales.