Transformación de plástidos de papa: caracterización de la expresión de la proteína heteróloga en los tubérculos

MARÍA EUGENIA SEGRETIN, EZEQUIEL M. LENTZ, FERNANDO BRAVO-ALMONACID

Rosario, Pcia de Buenos Aires, Argentina

Simposio; VII Simposio Nacional de Biotecnología REDBIO Argentina II Congreso Internacional-REDBIO-Argentina LA BIOTECNOLOGÍA y LOS FUTUROS ESCENARIOS MUNDIALES; 2009

Redbio

La expresión de proteínas heterólogas en plantas posee numerosas aplicaciones, como la producción de proteínas de interés industrial y la obtención de mayor tolerancia a estreses bióticos/abióticos. Para ello es necesario alcanzar altos niveles de expresión del transgén, siendo la transformación de plástidos una alternativa para lograrlo. Esta metodología fue puesta a punto en el grupo para N. tabacum y S. tuberosum var. Desiree con un vector propio (pBSW5´UTRGUS) que posibilita la transcripción del transgén a partir del promotor rrn endógeno y de los promotores incluídos en el vector Prrn y PpsbA. El objetivo del trabajo fue caracterizar la expresión del transgén uidA en hojas y tubérculos de plantas transplastómicas de papa. Para ello se utilizaron plantas crecidas en el invernadero e in vitro. La expresión de GUS en las hojas alcanzó niveles muy elevados, superiores al 20% de la proteína total soluble, tanto en plantas crecidas en invernadero como in vitro. En cambio, la expresión a nivel de tubérculos desarrollados en tierra fue mucho menor, y estaría relacionada al grado de maduración de los mismos. Sin embargo, en los tubérculos desarrollados in vitro, los niveles de GUS aumentaron considerablemente, junto con un cambio en el perfil de los ARNs transcriptos a partir de la construcción genética, siendo mayoritario el ARN derivado del PpsbA (igual que en hojas), a diferencia de lo observado en los tubérculos de tierra. Los valores obtenidos son los más altos reportados hasta la fecha para la expresión de proteínas en plantas transplastómicas de papa.