INGEBI   02650
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN INGENIERIA GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR "DR. HECTOR N TORRES"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EL SILENCIAMIENTO GÉNICO DE LA PROTEÍNA RIBOSOMAL L19 BLOQUEA LA PROGRESIÓN DEL CICLO CELULAR EN TRYPANOSOMA BRUCEI
Autor/es:
MANZUR MJ; ZARATE JM; SIMONETTI L; SCHLESINGER M; SCHOIJET AC; ALONSO GD; JURI AYUB M
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XXVII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
La proteína ribosomal L19 forma parte de la subunidad mayor de los ribosomas eucariotas. En tripanosomátidos, dicha proteína posee, además del dominio canónico (PF01245), una extensión C-terminal de función desconocida. Con el objetivo de caracterizar funcionalmente esta proteína, generamos una línea de T. brucei que expresa de manera inducible un RNA interferente para L19. Luego de la inducción del RNAi con tetraciclina, corroboramos el silenciamiento de L19 mediante Western Blot. Ensayos de marcación metabólica mostraron que L19 es esencial en el proceso de traducción, ya que el silenciamiento de la misma provoca una disminución abrupta en la tasa de síntesis proteica (24 hs post inducción), observándose posteriormente una caída en la proliferación celular (48 hs post inducción). La caracterización morfológica de los parásitos silenciados mostró un aumento del tamaño de los mismos respecto al control, y la presencia de núcleo, kinetoplasto y flagelo duplicados. Estos resultados sugieren que el silenciamiento de la proteína ribosomal L19 en T. brucei induce un bloqueo del ciclo celular, probablemente a nivel de la citocinesis, durante la entrada del surco de segmentación. En base a todo esto, proponemos que el bloqueo de la traducción tiene como efecto una disminución de la concentración intracelular de alguna/s proteína/s de vida media corta, esencial/es para completar el ciclo celular. En estudios futuros planeamos analizar qué etapa de la traducción y de la citocinesis es inhibida por el silenciamiento, y evaluar los niveles de proteínas involucradas en la progresión del ciclo celular mediante Western Blot e Inmunofluorescencia.