INGEBI   02650
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN INGENIERIA GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR "DR. HECTOR N TORRES"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Rol de la fosforilación en la regulación de las actividades biológicas de la proteína de movimiento TGBp1 de potexvirus.
Autor/es:
ZELADA A
Lugar:
Buenos Aires, ARGENTINA
Reunión:
Conferencia; Congreso Nacional de Virología; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
Rol de la fosforilación en la regulación de la actividad de la proteína de movimiento TGBp1 de potexvirus. Alicia Zelada. CONFERENCIA. El Potato virus X (PVX) es un virus de plantas, miembro tipo del género Potexvirus. Su genoma está compuesto por una única molécula de ARN que codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (MPs: TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la proteína de la cápside (CP).  PVX ha sido extensamente utilizado como sistema modelo para el estudio de la replicación y la movilización viral. En nuestro laboratorio nos hemos enfocado en determinar los mecanismos que regulan la actividad de la proteína de movimiento TGBp1 y su rol en la movilización viral. La proteína TGBp1 se caracteriza por ser una proteína multifuncional cuya principal función es asistir en la dispersión célula a célula y en el transporte sistémico de la progenie viral a través de los tejidos de la planta. El movimiento célula a célula implica la formación de un complejo ribonucleoproteico formado por el ARN viral, la proteína TGBp1 y CP el cual es transportado a través del plasmodesmo a las células vecinas. Este transporte es facilitado por la actividad ARN helicasa de TGBp1 que evita la formación de estructuras secundarias en el ARN viral. La energía necesaria para esta actividad es provista por la propia TGBp1 a través de su actividad NTPasa. Por otra parte, se ha demostrado que la proteína TGBp1 es una proteína supresora del silenciamiento génico post-transcripcional (PTGS), actividad que es necesaria pero no esencial para el transporte célula a célula del virus. En nuestro laboratorio hemos demostrado que la proteína TGBp1 es fosforilada por una quinasa celular tipo CK2 en al menos tres residuos, Ser162, Thr193 y Thr215. A través de ensayos de infección en plantas de Nicotiana tabacum y Nicotiana benthamiana con viriones mutantes determinamos que la fosforilación de TGBp1 en los residuos Thr193 y Thr215 es esencial para la producción de una infección sistémica. Dado que la actividad ATPasa de TGBp1 es requerida para la movilización viral analizamos el efecto de la fosforilación sobre esta actividad. Demostramos que existen en el extremo C-terminal de TGBp1 dos dominios regulatorios de la actividad ATPasa. El dominio donde se encuentra la Thr193, regula positivamente la hidrólisis de ATP y el dominio donde se encuentra la Thr215, la regula negativamente. La fosforilación en la Thr193 disminuye la actividad ATPasa de TGBp1, mientras que la fosforilación en la Thr 215 la aumenta, por lo cual proponemos que la función de la fosforilación es contrarrestar los efectos regulatorios de los  dominios identificados permitiendo de esta forma regular los niveles de ATPasa de TGBp1 por fosforilación y desfosforilación. Por otra parte, la fosforilación en las Thr193 y Thr215 no tienen efecto sobre la localización subcelular de la TGBp1, sin embargo, la fosforilación en la Thr193 regula la estabilidad de la proteína in vivo impidiendo su degradación vía proteasoma. Estos resultados demuestran la importancia de la fosforilación en la regulación de la movilización de PVX.