Señalización celular en Trypanosoma cruzi.

SCHOIJET, ALEJANDRA; KILDARE, MIRANDA; DOCAMPO, ROBERTO; TORRES, HÉCTOR N.; FLAWIÁ, MIRTHA M.; ALONSO, GUILLERMO

Porlamar, Margarita- Venezuela

Congreso; XVIII Congreso Latinoamericano de Parasitología; 2007

Congreso Latinoamericano de Parasitología

    Trypanosoma cruzi, posee un ciclo de vida complejo, durante el cual, se enfrenta a cambios repentinos en su entorno por lo que es imprescindible que dé una rápida respuesta. La producción del segundo mensajero AMPc, modula una amplia variedad de funciones tales como el crecimiento, la diferenciación entre estadios, el movimiento celular y la osmoregulación. Los niveles de AMPc están regulados tanto a nivel de la síntesis por las adenilil ciclasas (ACs) como así también de la degradación por acción de las fosfodiesterasas (PDEs). Anteriormente, nuestro grupo de trabajo ha caracterizado una adenilil ciclasa estimulable por calcio (TczAC) y la primer fosfodiesterasa descripta en T. cruzi (TcrPDEB2). Utilizando la secuencia de TcrPDEB2 para realizar búsquedas en las bases de datos de T. cruzi identificamos dos nuevas fosfodiesterasas (TcrPDEA1 y TcrPDEC2). TcrPDEA1 contiene sólo el dominio característico de las fosfodiesterasas y la enzima recombinante presenta una alta Km para AMPc (190 μM). TcrPDEC2, mostró ser específica para AMPc y sensible a los inhibidores rolipram y etazolato, dos características relevantes de las PDE4 de mamíferos. Además, TcrPDEC2 posee una secuencia “FYVE zinc-finger domain” en la región N-terminal, la cual esta presente en proteínas reclutadas por membranas ricas en fosfatidilinositol 3-fosfato. TcrPDEC2 fue capaz de complementar levaduras termosensibles y la enzima obtenida de la expresión en estas células mostró un valor de Km para el AMPc de 20 μM. Estudios de inmunofluorescencia en epimastigotes, permitieron determinar que TcrPDEC2 co-localiza con calmodulina, un marcador de la vacuola contráctil. Por último, parásitos que sobre-expresan una PI3K recientemente hallada en T. cruzi (TcVps34) por nuestro grupo, mostraron variaciones fenotípicas compatibles con alteraciones en la osmoregulación. Además, estos parásitos transgénicos mostraron defectos en la acidificación de las vacuolas y en la endocitosis mediada por receptor. Los avances en la descripción de los mecanismos de señalización presentes en el T. cruzi, nos permiten comprender como estos parásitos se relacionan con el entorno y son el primer paso en el desarrollo de respuestas especificas. Además, teniendo en cuenta que los kinetoplastidos representan una rama de divergencia temprana en la evolución de las células eucariotas los hallazgos realizados en estos parásitos nos permiten comprender mejor la evolución de los mecanismos de señalización.