Resistencia a drogas en Trypanosoma cruzi: familia de reductasas de citocromo P450.

PORTAL P; DE VAS M; FERNÁNDEZ VILLAMIL S; ALONSO G; TORRES H; FLAWIÁ M; PAVETO C

Chascomús. Buenos Aires, Argentina.

Congreso; XXII Reunión de la Sociedad Argentina de Protozoología.; 2007

La detoxificación de compuestos endógenos y xenobióticos es un proceso de biotransformación en dos fases. En una primera fase las moléculas pueden ser oxidadas, reducidas o hidroxiladas, y en una segunda fase, una serie de transferasas catalizan reacciones de conjugación con diversas moléculas para aumentar la solubilidad de dichos compuestos y poder eliminarlos. Las enzimas del citocromo P450 (CYP) participan en las reacciones de fase I y son las principales responsables del metabolismo oxidativo de xenobióticos. La citocromo P450 reductasa (CPR) transfiere electrones del NADPH hacia los CYP. Este trabajo presenta el clonado, expresión y caracterización bioquímica de tres CPRs de Trypanosoma cruzi, TcCPR-A, TcCPR-B y TcCPR-C. Sus secuencias aminoacídicas comparten un 11% de identidad, difieren principalmente en su extremo amino-terminal y presentan los dominios característicos de unión a FMN, FAD y NADPH. Las tres enzimas reducen al citocromo c en forma dependiente de NADPH y se inhiben parcialmente por el inhibidor de flavoproteinas (DPI). Reducen sustratos alternativos y participan en procesos de deaminación y deetilación dependientes de CYP,  ensayado en un sistema heterólogo in vitro. Mediante Western blot se demostró su presencia en todos los estadios de T. cruzi. La sobreexpresión de TcCPR-B en epimastigotes aumentó  la resistencia a Nifurtimox y Benznidazol.