“Diferenciación de las células madre mesenquimales de médula ósea humana a cardiomiocito adulto”

LABOVSKY, V.; GARCÍA, H.; HERNANDO INSÚA, A.; FELDMAN, L.; LEVIN M.J.; CHASSEING, N. A.

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; IV Simposio de Mecanismos moleculares y etiopatogénicos en la hipertensión arterial y enfermedades cardiovasculares. LII Reunión Científica Anual de la SAIC.; 2007

Diferenciación de las Células Madres Mesenquimales (MSC) de Médula Ósea (MO)  Humana a Cardiomiocito  Adulto. Actualmente existe gran interés en la cardiomioplastía con células madres (SC).  Debido a su multipotencialidad, inmunosupresión, fácil aislamiento, expansión y manipulación genética, las MSC de MO humana son adecuadas para esta terapia celular.  Sin embargo, el mecanismo por el cual actúan no esta definido (transdiferenciación y diferenciación o fusión celular). El objetivo de nuestro trabajo fue generar un sistema in vitro de MSC de MO humana capaces de diferenciarse a cardiomiocito adulto funcional que exprese proteínas específicas. De los protocolos de diferenciación estudiados dos fueron seleccionados como óptimos: 5-azacitidina (10uM) y permeabilización con estreptolisina–O (67 ng/ ml) en presencia de medio condicionado del cultivo primario de cardiomiocitos de ratas neonatales.  Células mononucleares de MO fueron obtenidas por gradiente de Ficoll-Hypaque y cultivadas a baja densidad celular para el aislamiento de MSC.  Las MSC fueron positivas para prolil-4-hidroxilasa, CD105, CD44 y presentaron plasticidad para dar osteocitos, condrocitos y adipocitos, así como capacidad de clonado para dar CFU-F. Los cardiomiocitos fueron identificados morfológicamente y caracterizados fenotipicamente por inmunocitoquímica y PCR. Resultados: semanas de cultivo post-inducción: 1ra algunas células presentaron  multinucleación y morfología poligonal (ball-like);  2da células con morfología de bastón (stick-like); 3ra-4ta   células que forman estructura de tipo miotubo con las células adyacentes.  Las MSC diferenciadas fueron positivas para desmina, actinina a sarcomérica, MLC-2a, conexina-43, GATA-4, b MyHC, NKx2.5, troponina I, SERCA-2 y b1-AR. Las MSC en medio control  expresaron conexina-43, actinina  a y GATA-4, indicando compromiso cardíaco. Estos resultados representan un modelo  para el desarrollo de terapias con MSC y muestran el potencial  de estas SC para la reparación cardíaca.