INGEBI   02650
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN INGENIERIA GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR "DR. HECTOR N TORRES"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Multiple ligation-dependent probe amplification (MLPA). Aplicación en argentina de un nuevo método para el estudio genético de pacientes y portadoras de distrofia muscular de duchenne/becker
Autor/es:
PIRRA L; DALAMÓN V; BOBILLO C; SALA A; MESA L; ELGOYHEN AB; CORACH D; DUBROVSKY A
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XLIV Congreso Argentino de Neurología; 2007
Resumen:
Introducción y objetivos: Para el diagnóstico molecular de DMD (Distrofia Muscular de Duchenne) el método habitualmente utilizado es la reacción de PCR (multiplex) que permite identificar sólo deleciones en 18 de los 79 exones del gen de la Distrofina, limitándose a varones afectados. MLPA es un nuevo método, recientemente utilizado en nuestro país, que permite identificar deleciones y duplicaciones en varones afectados y en portadoras mediante el screening de los 79 exones. El objetivo es mostrar las mutaciones en una población argentina de pacientes y portadoras de Distrofinopatías. Material y métodos: 13 DMD, 4 DMB (Distrofia Muscular de Becker) y 7 portadoras. Se purificó ADN de leucocitos y se utilizó para MLPA. Se emplearon sondas conteniendo una secuencia universal para primers, una de longitud variable y una complementaria al ADN. Fueron hibridizadas en posiciones adyacentes y ligadas. Los fragmentos resultantes fueron amplificados por PCR usando un par de primers. El producto fue identificado y cuantificado utilizando un secuenciador, detectando el número de copias de los 79 exones del gen de la Distrofina. Resultados: Se identificaron 20 mutaciones que incluyen: 9 deleciones y 1 duplicación en DMD, 2 deleciones y 1 duplicación en DMB, 6 deleciones y 1 duplicación en portadoras. Conclusiones: Este método permite investigar los 79 exones del gen de la Distrofina ampliando la capacidad de detección de mutaciones. Su aplicación a poblaciones en riesgo (portadoras) y pacientes con distrofinopatías hoy es posible en Argentina. Resulta ventajoso por sobre los métodos conocidos y debería ser el de elección en esta patología, sin aumento de los costos.