La expresión de proteínas antimicrobianas como AP24, lisozima y dermaseptina en plantas transgénicas de papa (var. spunta) confiere resistencia de amplio espectro contra patógenos bacterianos y fúngicos

MARÍA MERCEDES RIVERO PÉREZ, MENCACCI, NICOLÁS, TOUM, LAILA, PABLO I. PICCA, FURMAN, NICOLÁS, BRAVO-ALMONACID, FERNANDO, MENTABERRY, ALEJANDRO

Madrid, España

Congreso; Congreso internacional de Biotecnología BIOSPAIN BIOTEC.; 2006

El cultivo de la papa es susceptible a numerosas enfermedades, algunas extendidas mundialmente y otras confinadas a áreas más limitadas. Entre las enfermedades bacterianas más severas se encuentran el pie negro y la podredumbre blanda de tubérculos ambas afecciones causadas por la bacteria Erwinia carotovora.  Las enfermedades fúngicas de mayor impacto en la economía de la Argentina son la podredumbre seca de tubérculos causada por Fusarium spp. y el cancro del tallo cuyo agente etiológico es Rhizoctonia spp. Se transformaron plantas de papa de la variedad Spunta con diferentes construcciones genéticas expresando constitutivamente los genes que codifican la lisozima de pollo, la osmotina AP24 de tabaco y la dermaseptina de Phyllomedusa spp.  Diferentes líneas transgénicas de papa portando uno, dos o tres genes antimicrobianos fueron desafiadas en ensayos controlados de infección con Erwinia carotovora spp. atroseptica, Fusarium spp y Rhizoctonia spp. Las plantas y los tubérculos cosechados a partir de las líneas transgénicas más promisorias fueron desafiados con los diferentes patógenos y evaluados en su resistencia frente al ataque del/los microorganismos.  Diferentes líneas transgénicas candidatas se analizaron molecularmente por  PCR y por RT-PCR (PCR en tiempo real) utilizando pares de oligonucleótidos iniciadores específicos que amplifican las secuencias correspondientes a los tres genes de interés. El nivel de expresión de los transgenes fue evaluado por Western-blot. Los tubérculos y plantas ensayados fueron analizados histológicamente, luego de la infección con diferentes patógenos (3, 7 y 15 días post-inoculación), de manera de estudiar el desarrollo de las lesiones y la respuesta local de resistencia.  Las plantas transgénicas que expresan la combinación de dos y tres compuestos antimicrobianos presentaron incrementada resistencia frente a los patógenos en comparación con aquellas con un solo gen. Las respuestas observadas podrían ser explicadas como un resultado del sinergismo o efecto complementario entre los mencionados genes. En base a nuestras observaciones, el apilamiento de secuencias que codifican compuestos antimicrobianos diversos constituye una herramienta promisoria para la obtención de plantas resistentes a patógenos.