Mapeo de la interacción del complejo de las proteínas ribosomales P en Trypanosoma cruzi

SILVIA A LONGHI1, MAXIMILIANO JURI AYUB1,2, BENSON NYAMBEGA1,3, MARC LAVERRIÈRE1, REGINA CICARELLI4, MARIANO J. LEVIN1

Huerta Grande, Córdoba, Argentina

Congreso; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2006

Sociedad Argentina de Protozoología

En Trypanosoma cruzi (T. cruzi), el complejo de las proteínas ribosomales P conforman el pedúnculo o “stalk” de la subunidad mayor del ribosoma. Estas proteínas son componentes esenciales del ribosoma y controlan la actividad GTPasa del factor de elongación eEF-2. Es un complejo pentamérico formado por la proteína P0 (TcP0) de alrededor de 34 kDa, y las cuatro proteínas de bajo peso molecular de aproximadamente 11kDa llamadas TcP1a, TcP1b, TcP2a y TcP2b. En ensayos de doble híbrido en levaduras se demostró que TcP0 es el componente central ya que interactúa directamente con todas las otras proteínas P. Mediciones cuantitativas indicaron que la interacción TcP0-TcP1b es la más fuerte. Utilizando la técnica de “homogeneus time-resolved fluorescente” (HTRF) se estudiaron los siguientes pares interactuantes: TcP0-TcP1a, TcP0-TcP1b, TcP0-TcP2a  y  TcP2b-TcP1a, lo cual confirma los resultados obtenidos por doble híbrido y demuestra que este patrón de interacciones diferencia a T. cruzi de otros eucariotes como levaduras y mamíferos. Posteriormente, identificamos en TcP0 la región responsable de la interacción con las proteínas TcP1/TcP2 así como también la zona de TcP2a que interactúa con TcP0. Para determinar si el patrón de interacciones entre las proteínas P se conserva en otros trypanosomátidos, se están estudiando los complejos formados por TcP0 con las proteínas P bajo peso molecular de Trypanosoma brucei. Estos resultados demuestran la relevancia biológica de éstas interacciones protéicas