IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EVIDENCIA DE MAS DE UNA VÍA PARA IMPORTAR UDP-GLC AL RETÍCULO ENDOPLÁSMICO DE S. POMBE
Autor/es:
BREDESTON LUIS M; PRUCCA CESAR; LUJAN HUGO; PARODI ARMANDO; DALESSIO CECILIA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; XII Jornadas anuales de la Sociedad Argentina de Biologia; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biologia
Resumen:
La UDP-Glc:glicoproteína glucosiltransferasa (GT) es un sensor del plegamiento de glicoproteínas, que marca con una glucosa (Glc) las glicoproteínas parcialmente plegadas en el lumen del retículo endoplásmico (RE) como parte del ciclo de control de calidad de calnexina/calreticulina. El sustrato dador, UDP-Glc, es sintetizado en el citosol y se asume que entra al RE por un transportador de nucleótidos-azucares (TNA). Para identificar al gen correspondiente al transportador de UDP-Glc del RE en se analizó el genoma de la levadura de fisión Schizosaccharomyces. pombe. De los seis putativos transportadores de nucleótido-azúcares identificados en el genoma de Schizosaccharomyces pombe, sólo hut1+ y yea4+ presentan señal de retención en el RE. Ambos genes fueron disruptos en S. pombe en el contexto de mutante Dalg5, lo que permite asignar la formación de Glc1Man9GlcNAc2 unido a proteínas a la actividad de GT y por lo tanto a la entrada de UDP-Glc al lumen del RE. Vesículas de RE aisladas de mutantes Dalg5Dhut1 mostraron 50% de disminución en el transporte de UDP-Glc comparado con el de vesículas de Dalg5, sugiriendo que hut1+ está involucrado en el transporte de UDP-Glc al lumen del RE. Sin embargo el marcado in vivo de S.p Dalg5Dhut (y también de mutantes Dalg5Dyea4 y Dalg5Dhut1Dyea4) mostró la formación de Glc1Man9GlcNAc2. Esto sugiere que hay al menos otro camino para importar UDP-Glc al lumen de RE: a través de un NST que no posee la señal de retención clásica de RE por un mecanismo novedoso. El parásito Giardia lamblia provee un nuevo sistema para analizar transportadores de UDP-Glc ya que sus membranas sólo transportan UDP-GlcNAc. Hemos expresado los genes hut1+ y yea4+ de S.p. en dicho parásito y resultados preliminares confirmarían que hut1+ es un transportador de UDP-Glc. Estamos expresando el resto de los NST en este sistema para determinar su especificidad de sustrato