Galectina-8 endógena como modulador de la angiogénesis.

VÍCTOR MANUEL CÁRDENAS DELGADO; LORENA NUGNES; DANIEL COMPAGNO; GABRIEL ADRIÁN RABINOVICH; CARLOTA WOLFENSTEIN-TODEL; MARÍA TERESA ELOLA

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Las galectinas son una familia de lectinas animales que comparten la especificidad de unión por b-galactósidos. Varios miembros de esta familia controlan procesos vinculados a la progresión del cáncer tales como la transformación celular, la invasividad y la metástasis. Habiendo previamente establecido el rol de galectina-8 (Gal-8) como agente promotor del desarrollo de vasos sanguíneos, nuestro interés se centró en: 1-Determinar el perfil de expresión de galectinas con demostrada actividad pro-angiogénica (Gal-1, -3 y -8) en la línea de células endoteliales BAEC. 2-Efectuar el silenciamiento de Gal-8 en células BAEC mediante la técnica de RNA de interferencia (siRNA). 3-Estudiar el fenotipo resultante después del silenciamiento de Gal-8 endógena en células BAEC en cuanto a la angiogénesis in vitro. Los resultados del Western Blot demostraron la presencia de Gal-1 (14,5 kDa), Gal-3 (29 kDa) y 3 isoformas de Gal-8 (34, 36 y 38 kDa) en los extractos celulares. Los estudios de citometría de flujo confirmaron la presencia de Gal-3 y Gal-8 tanto en el compartimiento citoplasmático de las células BAEC como en su membrana. En contraste, Gal-1 se detectó solamente en el citoplasma. La inmunofluorescencia de las células BAEC permeabilizadas demostró la expresión de Gal-8 tanto en el núcleo como en el citoplasma. Asimismo, Gal-1 y Gal-3 exhibieron un patrón de tinción similar al de Gal-8. Con respecto al estudio de funcionalidad in vitro, las células BAEC transfectadas con un siRNA específico para Gal-8 bovina y cultivadas sobre matrigel experimentaron una reducción significativa en la longitud de los túbulos capilares (Control=100±15% vs. Gal-8-siRNA48h=33±7%, p<0,01) a las 48 hs post-transfección. Este hallazgo destaca la contribución de Gal-8 endógena al proceso de formación de túbulos capilares in vitro. En resumen, nuestros resultados revelan que las células endoteliales BAEC expresan un conjunto de galectinas pro-angiogénicas, donde Gal-8 parece desempeñar un rol importante, previamente ignorado.