Aislamiento y caracterización de exosomas de distintas fuentes como posibles nanocarriers de aTF a diferentes áreas del Sistema Nervioso Central

MATTERA, VS; PASQUINI, JM; GLISONI, R; CORREALE, J

Quilmes

Congreso; 3ra Reunión de Jóvenes Investigadores de CyT; 2018

Universidad Nacional de Quilmes

Resultados previos de nuestro laboratorio demuestran el efecto pro-diferenciante de laapotransferrina (aTF) sobre la célula oligodendroglial, observada tanto in vivo como invitro. Por otro lado, el efecto remielinizante de la aTf fue demostrado en el modelo animalde desmielinización inducido por cuprizona, en un modelo de hipomielinización inducidopor la deficiencia de hierro y en un modelo de Hipoxia/Isquemia (H/I). En este mismomodelo, hemos observado que la administración intranasal (iN) de aTf humana a unanimal neonato provee neuroprotección al cerebro. Los resultados muestran que la aTf(aunque en baja cantidad) llegó exitosamente al cerebro del ratón al que se le habíainducido la H/I, siendo detectada en el bulbo olfatorio, el lóbulo frontal y el cerebroposterior. El tratamiento redujo el daño de la sustancia blanca, la pérdida neuronal y laastrogliosis en diferentes regiones del cerebro, aumentando la proliferación ysupervivencia de los progenitores oligodendrogliales en la zona subventricular y en elcuerpo calloso. Estos datos previos nos indujeron a proponer el desarrollo de unatécnica menos invasiva y capaz de administrar aTf al SNC de forma controlada yutilizando la administración iN. Para ello proponemos aislar exosomas cargados de aTfpara ser adminsitrados intranasalmente. En esta primera parte del proyecto, se aislaronexosomas provenientes de plasma humano, plasma de ratón, líneas celulares deneuroblastoma (N2a), oligodendroglioma (OLN-93) y cultivo primario de astrocitos. Unavez aislados, se procedió a determinar su calidad, cantidad e integridad a través deWestern Blot, Dynamic Light Scattering (DLS) y Microscopía electrónica de Barrido(SEM) concluyendo que las nanopartículas fueron aisladas de manera pura y sinmodificaciones en su integridad, siendo las mismas adecuadas para ser cargadas.