IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
PARTICIPACIÓN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN XBP1 (X-BOX BINDING PROTEIN) EN LOS MECANISMOS DE OSMOPROTECCIÓN RENAL
Autor/es:
WEBER, KAREN; FERNANDEZ TOMÉ, MARIA DEL CARMEN; MALVICINI, RICARDO; PERAZZO, CECILIA; CASALI, CECILIA I; ERJAVEC, LUCIANA
Lugar:
San Luis
Reunión:
Jornada; VII JORNADAS DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR DE LIPIDOS Y LIPOPROTEINAS; 2017
Institución organizadora:
Universidad Nacional de San Luis
Resumen:
Fisiológicamente, las células de los túbulos colectores medulares renales se encuentraninmersas en un intersticio que posee la osmolaridad más alta del organismo. Esta elevadaosmolaridad está estrechamente relacionada con la función de la médula renal de llevar a cabola concentración final de la orina para mantener la homeostasis hídrica y electrolítica delorganismo. Así, las células epiteliales tubulares habitualmente están expuestas aconcentraciones altas y variables de NaCl y urea que, dependiendo del estado de diuresis de unindividuo, pueden llegar hasta 500 y 1000mM, respectivamente. Para enfrentar este entornoadverso las células han desarrollado mecanismos de protección y adaptación que involucra,entre otros, el aumento en el metabolismo lipídico para mantener la homeostasis de lasmembranas celulares y la expresión de numerosos genes osmoprotectores. Este aumentoabrupto en la síntesis de proteínas podría causar una sobrecarga proteica en el retículoendoplasmático lo que llevaría a lo que se conoce como estrés del retículo endoplásmico.Trabajos previos en nuestro laboratorio han demostrado que cambios en la hiperosmolaridadambiental induce la expresión de marcadores de estrés de retículo como CHOP y XBP1encultivos de células MDCK. XBP1 es un factor de transcripción que regula la expresión de variosgenes lipogénicos lo que conlleva a un aumento en la biogénesis de membranas y que podríaparticipar del mecanismo aliviador del estrés de retículo gracias a la expansión de lasmembranas de dicho compartimiento. Por otro lado, ha sido descripto que XBP1 puede regularla expresión de genes en forma independiente a la activación de estrés de retículo.El objetivo del presente trabajo fue evaluar si XBP1 participa en la regulación de los geneslipogénicos en células renales sometidas a estrés hiperosmolar. Para ello se cultivaron célulasMDCK en condiciones de isosmolaridad (control, 298 mOsm/KgH2O) e hiperosmolaridad (NaCl125mM, 512 mOsm/KgH2O) en ausencia o en presencia de un inhibidor de la vía del XBP1,4µ8C, o en células tratadas con un siRNA silenciador de la expresión de la proteína XBP1. Luegode 24 h de tratamiento se evaluó la incorporación de 14C-glicerol a los fosfolípidos (FLs), lostriglicéridos (TGs) y el intermediario de síntesis diacilglicerol (DGs), como parámetro de síntesisde novo, así como la expresión de las enzimas que participan de esta vía por medio de latécnica de RT-PCR.El tratamiento con medio hiperosmolar causó un aumento significativo en la biosíntesis de lastres especies lipídicas. En estas condiciones, también se encontró incrementada la formamadura del mRNA de XBP1 (s-RNA), lo que conlleva a un aumento en su traducción obteniendouna mayor cantidad de este factor de transcripción XBP1. El tratamiento de las células con4µ8C, inhibidor de la actividad de RNAsa asociada a IRE1, disminuyó la biosíntesis de TGs enforma dependiente de la concentración; concomitantemente se observó una acumulación en laradioactividad asociada al DG. Sin embargo, no se observaron cambios en la radioactividadasociada a los FLs. Un efecto similar se observó cuando las células fueron tratadas con el silenciador de XBP1. Cuando se analizó la expresión de enzimas lipogénicas, se encontródisminuido el mRNA de las enzimas DGAT2 y de la Lipina2.En conjunto estos resultados indican que la hiperosmolaridad induce la activación del factor detranscripción XBP1 el cual participa de la regulación la síntesis de lípidos en las célulasepiteliales de estirpe renal, y evidencian la relevancia de XBP1 que a través de este mecanismopodría estar ejerciendo un efecto osmoprotector