La expresión de galectina-8 es regulada por los niveles de su ligando ALCAM (?activated leukocyte cell adhesion molecule?, CD166): implicancias en tumor de mama.

FERRAGUT, FÁTIMA; WOLFENSTEIN-TODEL, C.; COLOMBO, LUCAS L.; MOROSI, LUCIANO G.; RABINOVICH, GABRIEL A.; ABT, ARACELI; TRONCOSO, MARÍA F.; ELOLA, MARÍA TERESA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXXII Jornadas de Oncología 2017, Instituto de Oncología Ángel H. Roffo.; 2017

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES ONCOLOGICAS ANGEL ROFFO

Título:LA EXPRESIÓN DE GALECTINA-8 ES REGULADA POR LOS NIVELES DE SU LIGANDO ALCAM (?ACTIVATED LEUKOCYTE CELL ADHESION MOLECULE?, CD166): IMPLICANCIAS EN TUMOR DE MAMA.Autores: Fátima Ferragut, Araceli Abt, Luciano G. Morosi, Vanina Vachetta, Clara Sánchez Terrero, Carlota Wolfenstein-Todel, María F. Troncoso, Gabriel A. Rabinovich, Lucas L. Colombo, María T. Elola.Abstract:Galectina-8 (Gal-8) es una lectina que posee dos dominios de reconocimiento de carbohidratos en tandem, que ha sido implicada en varios procesos tumorales. En nuestro laboratorio, hemos hallado un ligando de Gal-8 llamado ?activated leukocyte cell adhesion molecule? (ALCAM/CD166) en células endoteliales y epiteliales. En este trabajo, los objetivos fueron: 1) Analizar la expresión de Gal-8 y ALCAM en células tumorales mamarias humanas MDA-MB-231, a nivel de mRNA y proteínas; 2) Evaluar la localización subcelular de Gal-8 y ALCAM, y sus modificaciones al silenciar cada una de estas moléculas; 3) Evaluar los efectos de Gal-8 y ALCAM en un modelo de xenotransplante en ratones nude. En nuestra metodología, establecimos líneas celulares MDA-MB-231 en las cuales la expresión de Gal-8 (MDA-shGal8) y/o de ALCAM (MDA-shALCAM) fue silenciada mediante la transducción con vectores lentivirales portadores de shRNA específicos; las células controles fueron tratadas con shRNAs inespecíficos (MDA-shControl); hemos efectuado estudios de PCR en tiempo real (RT-qPCR) utilizando dos genes housekeeping, ensayos de Western blot y de inmunofluorescencia en microscopio confocal. Nuestros resultados de RT-qPCR mostraron que las células tumorales mamarias MDA-shALCAM poseen niveles disminuidos (51,4±5,7%) de mRNA de Gal-8, respecto a las células controles MDA-shControl (p0,05; n=3). Mediante microscopía confocal, detectamos una novedosa localización de ALCAM en el núcleo de las células MDA-shControl y MDA-MB-231, además de su ubicación típica en membrana plasmática y citoplasma. En ensayos de crecimiento tumoral in vivo, inoculamos ratones nude con las líneas de células tumorales controles o silenciadas para Gal-8 y/o ALCAM, comprobando que el silenciamiento de ALCAM y el de Gal-8 disminuyeron significativamente (p