Análisis termodinámico del efecto de sales sobre la interacción entre la helicasa NS3 del virus del dengue virus y ARN de cadena simple

GEBHARD L. G.; CABABIE LA; KAUFMAN SB,; GONZÁLEZ LEBRERO, RM,; GAMARNIK A V; INCICCO JJ

CABA

Congreso; Protein Biophysics at the end of the world; 2017

La proteína NS3 del virus del Dengue (DENV) es una helicasa que cataliza la hidrólisis de ATP y acopla la energía libre de esta reacción a los procesos de locomoción sobre hebras simples y desplegado de cadenas dobles de ARN. La mayoría de las interacciones proteína-ácido nucleico son extremadamente sensibles a la concentración de sales presentes en solución. Ello se debe a que los ácidos nucleicos lineales son polianiones altamente cargados y por lo tanto capturan cationes de su vecindad reduciendo así su carga neta. Numerosos estudios indican que los efectos de cationes, aniones, pH y temperatura se hallan termodinámicamente acoplados. Por lo tanto, para determinar el/los efecto/s que ejerce alguna de estas variables es necesario conocer en detalle cómo operan las otras y esta información es imprescindible para dilucidar los múltiples equilibrios de unión que participan en la interacción NS3/ARN. Presentaremos en la reunión resultados de estudios del efecto de diferentes cationes (K+, Na+ y Rb+) sobre la interacción NS3/ARNcs. Aplicando la teoría de Manning [1] determinamos que 10 interacciones iónicas están involucradas en el proceso de unión. Adicionalmente estudiamos el efecto de la temperatura sobre la interacción NS3/ARN y determinamos las contribuciones entálpicas y entrópicas a la energía libre de Gibbs asociadas al efecto de las sales sobre el equilibrio NS3/ARNcs. Los resultados indican que la asociación de la NS3 al ARN es preponderantemente entálpica y los cambios en ΔrGºobs, por el incremento en la concentración de sales se explican en su totalidad por la variación de la contribución entrópica la cuál, se observó, es lineal con log[K+].