Desarrollo de un sistema de detección de cepas de E coli enterohemorrágica causantes del Síndrome Urémico Hemolítico

SEWELL E; IGLESIAS, M; GONZÁLEZ R; KRETOWICS M; SANTOS J; TOSCANINI, MA; SACERDOTI M; MANZI M

Ciudad de Buenos Aires

Jornada; VI Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2016

Facultad de Veterinarias-UBA

En la Argentina el síndrome urémico hemolítico (SUH) es una enfermedad endémica. El consumo de alimentos y agua contaminada son las principales fuentes de contagio con Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) cuya infección puede evolucionar al SUH. Nos propusimos desarrollar un kit rápido, de operación sencilla y de bajo costo, para la detección de bacterias patógenas utilizando toehold switches vehiculizados por un bacteriófago. Por búsqueda bibliográfica se seleccionaron como blancos de detección los genes ureD y espK por permitir identificar de forma específica los 7 serogrupos más prevalentes de EHEC. Para el reconocimiento del ARNm de cada uno de dichos genes se diseñaron dos moléculas de ARN toehold switches que al reconocerlos se activan. Sólo en el caso de estar presentes ambos ARNm se emite una señal fluorescente medible. Inicialmente, para evaluar el sistema de detección se trabajó con el ARNm de ureD y se generó una bacteria blanco simil patógena de ECEH. Se generó el correspondiente toehold switch por PCR secuenciales y se purificó para su posterior incorporación en un plásmido. Actualmente estamos evaluando la eficiencia de nuestro sistema de detección que permitirá la identificación simultánea de los 7 serogrupos de EHEC más prevalentes.