IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
IDENTIFICACIÓN DE PEQUEÑAS MOLÉCULAS INHIBIDORAS DE LA ENTRADA DEL VIRUS DE LA DIARREA VIRAL BOVINA A TRAVÉS DEL DISEÑO GUIADO POR COMPUTADORA
Autor/es:
EMILSE S. LEAL ; MARÍA JOSÉ PASCUAL; DIEGO E. ALVAREZ; MARIELA BOLLINI
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XX simposio nacional de quimica organica; 2015
Institución organizadora:
sociedad argentina de investigacion en quimica organica
Resumen:
El virus de la diarrea viral bovina (BVDV) es un patógeno del ganado vacuno. Lainfección con BVDV reduce la productividad causando pérdidas económicas para laindustria ganadera. La partícula viral comprende una membrana lipídica asociada a dos glicoproteínas de envoltura E1 y E2, que rodean a la nucleocápside que contiene el genoma de RNA del virus. E2 cumple un rol fundamental para la entrada del virus a la célula huésped dado que interacciona con receptores en la superficie de la célula que median la internalización por endocitosis de la partícula viral, y es esencial en la fusión de la envoltura del virus con la membrana del endosoma en medio ácido para liberar el genoma de RNA en el citoplasma de la célula infectada. El objetivo de este trabajo es usar E2 como blanco de pequeñas moléculas para inhibir la entrada de BVDV y determinar las bases moleculares de su mecanismo de acción. Para este fin se empleó el diseño guiado por computadoras para identificar posibles sitios ?drogables? en E2momomérica y dimérica. Se hallaron dos sitios potenciales de unión a ligandos: cluster de amionacidos hidrofóbicos en dominio IIIc y en la interfaz entre el dominio I y II. Se llevó a cabo un screening virtual en ambos sitios drogables utilizando la librería de compuestos provenientes de Maybridg. Se sintetizaron los candidatos más promisorios y se realizó luego un screening de actividad antiviral mediante ensayos de reducción del efecto citopático en células en cultivo. Como resultado se identificó un derivado de benzimidazol (BZ-01) y de tetrahidroquinolina (THQ-02) con actividad antiviral en el rango micromolar que además no presentaba un efecto citotóxico sobre células MDBK. A partir de los resultados de actividad obtenidos, se llevó a cabo un refinamiento estructural de las moléculas activas BZ-01 y THQ-2, se sintetizaron los potenciales candidatos y se determinó reducción del efecto citopático en células en cultivo. En general, todos los compuestos sintetizados presentaron igual o mejor actividad que sus moléculas predecesora.Con el fin de evaluar en qué etapa de la infección (adsorción, internalización óreplicación) actuaban estos compuestos se realizaron ensayos de tiempo de adición. Se observó que ambos compuestos son activos durante la entrada del virus. BZ-01 provoca una reducción del 50% en la etapa de internalización, mientras que THQ-02 disminuye en un 60% la adsorción a la superficie de la célula. Los resultados obtenidos indican que utilizando la proteína de envoltura E2 de BVDV como blanco para el diseño de drogas guiado por computadoras, se llegó a la identificación de los derivados BZ-01 y THQ-2 que funcionan como inhibidores de entrada del virus a la célula huésped.