IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Nanopartículas poliméricas: Síntesis y empleo como fase pseudoestacionaria en electrocromatografía capilar
Autor/es:
GRELA, DENISE A.; COLLAZO, DAIANA; ZANNONI, VALERIA; VIZIOLI N
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Congreso; Nanocordoba 2014; 2014
Resumen:
Las nanopartículas (NPs) y los materiales nanoestructurados han atraído el interés de muchos grupos de investigación, teniendo un significativo impacto en campos como la química, la ciencia de los materiales, la física, la medicina y la electrónica. Las NPs poseen una alta relación superficie-volumen, lo cual es importante en cromatografía ya que aumenta los sitios de interacción. Es debido a esto que en los últimos años han adquirido importancia en las separaciones analíticas, entre ellas, la electrocromatografía capilar (CEC). La CEC es un método híbrido de separación que combina la alta eficiencia de la electroforesis capilar junto con la selectividad y diversidad de fases estacionarias que tiene la cromatografía líquida de alta performance [1, 2]. Normalmente, la CEC es llevada a cabo empleando columnas empacadas, monolíticas o de tubo abierto. Un cuarto tipo de CEC emplea fases pseudoestacionarias (PSP), con la ventaja de no requerir empacado ni fritas [3], además proporcionan sitios de interacción con los analitos. En este trabajo presentamos la síntesis de nanopartículas poliméricas y su aplicación como PSP en CEC para la separación selectiva de péptidos sintéticos. Las nanopartículas fueron sintetizadas empleando la técnica de polimerización-precipitación, en la cual se uso ácido metacrílico como monómero y etilenglicoldimetacrilato como monómero entrecruzante. La reacción se llevo a cabo en baño de agua a 60° C durante 24 h, utilizando peróxido de benzoílo como iniciador. El ácido metacrílico (pKa 4,65), brinda cargas negativas a las partículas. Las NPs obtenidas, luego de ser lavadas fueron caracterizadas por dispersión de luz dinámica y microscopía electrónica de transmisión, presentando forma esférica, con un z-average de 440-640 nm. Suspensiones acuosas de las mismas se probaron como fase pseudoestacionaria en CEC. Primeramente se lleno el capilar con electrolito (BGE), luego se inyectó hidrodinámicamente la suspensión acuosa de NPs a 0,7 psi durante 4 s. A continuación se inyectó hidrodinámicamente la muestra de péptidos a 0,3 psi por 3 s y se aplicó 10 kV de voltaje. Esta técnica se conoce como "Técnica de llenado parcial", la cual permite una interacción de los péptidos con las NPs, generando que estas últimas no interfieran en la detección de los péptidos, ya que migran en sentido opuesto a los mismos (los péptidos migran hacia el detector UV y las NPs hacia el lado opuesto ya que poseen carga negativa). El BGE consistió en un buffer fosfato de sodio 25 mM, pH 7,0, llevado a pH con ácido clorhídrico. Los resultados mostraron que a pH 7,0 el flujo electroosmótico no fue afectado por la presencia de las NPs. A su vez, los picos correspondientes a dos de los cinco péptidos ensayados (bradiquinina y hormona liberadora de hormona luteinizante, LHRH) no se observaron en presencia de las NPs. Estos resultados sugieren una fuerte interacción de las NPs con los péptidos básicos (bradiquinina y LHRH) que migran más rápido en el capilar, por poseer una carga neta positiva mayor a los otros tres péptidos ensayados (angiotensina I, oxitocina y metionin-encefalina), lo que estaría ocasionando la captura de ambos péptidos por las NPs. En tal sentido, la interacción observada podría ser aprovechada con el fin de aumentar la capacidad de resolución fundamentalmente de péptidos básicos en diferentes sistemas separativos.