IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Disminución de la acumulación de hierro en células CHO debido a la expresión heteróloga de la P5-ATPasa ATP13A2
Autor/es:
DéBORA E. RINALDI; MARTÍNEZ CUESTA, LUCÍA; CORRADI GERARDO R; ADAMO H.P.; DE TEZANOS PINTO FELICITAS
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013
Resumen:
Las ATPasas de tipo P son transportadores de membrana energizados por la hidrólisis de ATP. Se han dividido en cinco subfamilias denominadas P1-P5. Las P5-ATPasas se expresan solamente en eucariotas y se desconoce el sustrato que transportan. Se identificaron 5 genes humanos denominados ATP13A1-ATP13A5, que pertenecen a las P5-ATPasas. Mutaciones en el gen ATP13A2 causa una forma de Parkinson1. Recientemente demostramos que la expresión heteróloga de la ATP13A2 en células CHO (CHO-ATP13A2) aumenta la incorporación de espermidina2. La marcación de células CHO-ATP13A2 con un marcador específico de lisosomas y endosomas tardíos, mostró un aumento del tamaño de estas vesículas. Además encontramos que las células CHO-ATP13A2 son más resistentes al tratamiento con FeCl3. Esto sugiere que el aumento de tamaño de las vesículas ácidas permite una mayor acumulación de poliaminas u otras sustancias capaces de quelar el hierro, manteniéndolo en un estado redox inactivo; o que el incremento de la macroautofagia inducida por la expresión de la ATP13A23 modificaría el transporte de hierro intracelular, facilitando su eliminación. Por esto medimos el contenido de hierro de células CHO-ATP13A2 mediante tinción de Perl y ferrocina. Encontramos que células CHO expresando una mutante inactiva de la ATP13A2 (CHO-508) acumuló 100 nmol de Fe/mg prot, mientras que células CHO-ATP13A2 acumularon 50 nmol de Fe/mg prot, durante 24 hs de incubación con 0,25mM FeCl3. La cinética de entrada de hierro fue similar en ambos tipos de células. Estos resultados sugieren que la ATP13A2 protege de la citotoxicidad inducida por hierro favoreciendo su eliminación. 1. Ramirez, A. y col (2006) Nat. Genet., 38, 1184-1191. 2. de la Hera y col. (2013) Biochemical Journal, 450, 47-63. 3. Gusdon, A.M. y col. (2012) Neurobiology of Disease, 45, 962-972.