Regulación de la expresión de la ciclooxigenasa 2 en células de estirpe renal sometidas a estrés osmolar

CASALI, CECILIA IRENE; WEBER, KAREN; GOMEZ MOREL, EMANUEL; FERNANDEZ , MARIA DEL CARMEN

CABA

Jornada; V JORNADAS DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR DE LIPIDOS Y LIPOPROTEINAS; 2012

C

Las células de la médula renal se encuentran en un entorno con la mayor osmolaridad del organismo. Sin embargo, sobreviven y desempeñan sus funciones gracias a que implementan mecanismos de defensa y adaptación, como la transcripción de genes “osmoprotectores”. La enzima ciclooxigenasa-2 (COX-2) es considerada necesaria para la defensa celular y si bien su expresión aumenta en hiperosmolaridad, su función asi como los mecanismos que regulan su expresión en estas condiciones no se han esclarecido. TonEBP es el factor de transcripción involucrado en la expresión de numerosos genes osmoprotectores en hipertonicidad. Considerando estos antecedentes, el objetivo del siguiente trabajo es estudiar el rol de COX-2 en la supervivencia celular y la participación de TonEBP en la regulación de su expresión. Para ello se cultivaron células MDCK de estirpe renal en medios isoosmóticos (298 mOsm/Kg H2O) e hiperosmóticos(NaCl y/o urea, 500 mOsm/Kg H2O) durante 24 horas y se evaluó la expresión de COX-2 y TonEBP por western blot y la actividad de COX-2 mediante un ensayo de radioconversión con [14C*]-ácido araquidónico. Asimismo se determinó la supervivencia celular mediante el método de tripan blue cuando se bloquea la expresión (RNAsi) o la actividad de COX-2 (NS398). Por último se bloqueó la expresión de TonEBP mediante RNAsi y se evaluó la expresión de COX-2 por western blot y la supervivencia celular mediante el método de tripan blue. Los resultados obtenidos indican que hay un aumento de la actividad y la expresión de COX-2 el cual es necesario para la supervivencia celular y que la activación en la transcripción de COX-2, inducido por el incremento en las concentraciones de sodio y no de urea, es mediada por TonEBP.