Una lesión global de la retina de pez cebra induce la expresión de los ARNm de señales purinérgicas que controlan la proliferación celular in vivo.

ARIADNA BATTISTA; CARLOS DAVID BRUQUE; MARIA PAULA FAILLACE

Buenos Aires

Jornada; VIII REUNION ANUAL AIVO, Jornada en el 29º Congreso Panamericano de Oftalmología.; 2011

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología

Una lesión global de la retina de pez cebra induce la expresión de los ARNm de señales purinérgicas que controlan la proliferación celular in vivo. A global injury of zebrafish retina induces mRNA expression of purinergic signals that control in vivo cell proliferation. Battista AG1, Bruque CD1, Faillace MP1,2 1Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UBA  2IQUIFIB-CONICET Email: bruque_carlos@hotmail.com   OBJETIVOS Examinar el rol de las señales purinérgicas sobre la proliferación de progenitores retinianos luego de un tratamiento intravítreo con una alta concentración de ouabaína, que provoca muerte celular en todas las capas retinianas en la retina de pez cebra (Danio rerio). METODOS Inyecciones intravítreas de ouabaína 10 μM (lesión citotóxica). Seis días de inyecciones de bromodeoxiuridina (BrdU) y simultáneamente se inyectó apirasa, antagonistas de receptores purinérgicos, o un inhibidor de actividad ecto-ATPasa. Se realizó inmunofluorescencia para detectar células positivas para BrdU o el receptor P2Y1 sobre cortes del tejido a diferentes días posteriores al daño (dpi). Se cuantificaron los niveles de ARN mensajeros (ARNm) de las NTPDasas (catalizan la hidrólisis extracelular de nucleótidos) y receptores purinérgicos mediante la técnica de RT-PCR cuantitativa en tiempo real. RESULTADOS La acción de nucleótidos extracelulares endógenos sobre receptores P2Y1 y la actividad NTPDasa fue esencial para inducir actividad proliferativa de las células progenitoras, con un máximo a los 7 dpi, tanto en la zona ciliar marginal (CMZ) como en las capas maduras de la retina globalmente dañada. Además, la expresión del ARNm del receptor P2Y1 mostró un incremento significativo durante la etapa proliferativa, mientras que otros receptores purinérgicos no exhibieron cambios. A su vez, la expresión proteica del receptor P2Y1 presentó niveles aumentados y una distribución diferencial luego de la lesión. También se observó un incremento significativo de los niveles de ARNm de las NTPDasas 1, 2 y 3 durante la etapa de proliferación celular. CONCLUSIONES Así como ocurre cuando el daño sólo involucra las capas internas, las señales purinérgicas resultan indispensables para inducir la entrada en fase S de las células progenitoras retinianas tanto en la CMZ como en el tejido maduro.   SUBSIDIOS FONCyT-BID 1728/04- PICT 2004-25422; CONICET-PIP 2009-2011-0169.