CAMBIO CONFORMACIONAL Y AGREGACIÓN DE D78D, UNA VARIANTE DIMÉRICA TODO B DE IFABP.

ANGELANI, C.R.; CABANAS, I.S; CARAMELO, J.J.; DELFINO J.M.; CURTO L.M.

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica (SAB).; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

La exposición de IFABP a proteasas permite identificar fragmentos que preservan estructura y función. Así, por la acción de clostripaína se obtuvo D98D, y a partir de ella, D78D, un fragmento límite correspondiente al segmento 29-106 de IFABP. D78D resulta soluble, estable y forma un dímero levemente expandido que conserva la funcionalidad de la proteína original1. Por su estrecha relación con IFABP y contar con características estructurales únicas, esta proteína nos permite evaluar comparativamente cómo la acción de un agente perturbador -como es el trifluoroetanol (TFE)- impacta sobre la conformación y la tendencia a la agregación de un motivo todo-b. La posibilidad de formar agregados de tipo amiloide se examinó por su capacidad de unir los colorantes Tioflavina-T y Congo Red, y mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM). La medida de la absorción aparente a 350 nm a distintas concentraciones de TFE (0 ? 70 % v/v) revela un máximo de agregación a 25 %. Asimismo, la unión a colorantes muestra un perfil similar al obtenido por turbidimetría, indicando que los agregados resultantes tendrían características de tipo amiloide, conclusión apoyada por los resultados de TEM que revelan ausencia de agregación amorfa. Independientemente, datos de espectroscopía óptica (dicroismo circular y fluorescencia) dan cuenta de la modulación conformacional inducida por TFE. 1 Franchini GR, Curto LM, Caramelo JJ, Delfino JM (2009) Protein Sci 18: 2592-2602.