IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
El ADP: un novedoso modulador del volumen celular en células de hepatoma humano.
Autor/es:
ESPELT M.V; ALVAREZ C; DE TEZANOS PINTO F; SCHWARZBAUM P.J
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2011
Resumen:
La exposición de células hepáticas y de hepatoma a medios hipotónicos, induce el aumento del volumen celular seguido de la pérdida de iones y con agua. Esto provoca disminución regulatoria del volumen celular (RVD) que tiende a restaurar los valores de volumen a niveles control. El aumento de volumen en células hepáticas estimula la salida de ATP, el cual puede interactuar con receptores P2 y al mismo tiempo ser degradado a ADP por la actividad ectoATPasa de eNTPDasas. El objetivo del presente trabajo es estudiar la variación de volumen en células Huh-7 incubadas en medio hipotónico (Hypo), y el rol del ATP y/o ADP extracelulares en el RVD. La exposición de las células a Hypo generó aumento del volumen celular seguido de RVD de 40.8±7.80 % a los 40 min (RVD40), mientras que la concentración de ATPe aumentó 2.4 veces sobre el nivel basal (17 min). En Hypo con apirasa, una enzima que remueve el ATP y el ADP, el RVD fue similar al observado en Hypo solo (RVD40api=42.2±9.71 %) indicando que el ATP no mediaría el RVD. Sin embargo, en presencia de Hypo+Cibacron Blue y Suramina (inhibidores de receptores P), se inhibió el RVD sugiriendo un posible papel de los nucleótidos extracelulares en la respuesta. Las células incubadas en Hypo+(Na+/K+)-ATPasa (enzima que cataliza la producción de ATP a ADP) mostraron una fuerte activación del RVD (RVD40=106.1±14.31%). Resultados similares se observaron al agregar el agonista de ADP, 2-Metil tio ADP, mientras que un inhibidor del receptor P2Y13 revirtió esta activación. Experimentos de RT-PCR mostraron la presencia de mRNA para el receptor P2Y13 y para eNTPDasa 2 (enzima que principalmente hidroliza ATP a ADP). En conclusión, estos resultados muestran por primera vez al ADP como molécula estimuladora del RVD que actuaría por su interacción con el receptor P2Y13. El ATP liberado al aumentar de volumen podría ser convertido a ADP por medio de la eNTPDasa 2.