Estudio de los efectos biológicos de nanopartículas de lecitina destinadas al transporte de pequeños RNA de interferencia (siRNA)

GÁNDOLA, Y; IRENE, P; PÉREZ, S; CARLUCCI, A; SOTELO, I; TURYN, D; GONZÁLEZ, L

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión científica anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica SAIC

El silenciamiento de genes por interferencia con RNA es un proceso natural que implica la degradación de mRNA mediante siRNA. El mayor impedimento para la utilización de esta tecnología con fines terapéuticos es la vehiculización de estas moléculas. La lecitina es 98% p/p fosfadidilcolina (PC), y es muy utilizada en farmacéutica como componente de liposomas, micelas mixtas y emulsiones submicrónicas. Nuestro grupo ha caracterizado nanopartículas de lecitina capaces de unir siRNA, las cuales representan plausibles sistemas para la vehiculación de siRNA. El objetivo de este trabajo es analizar citotoxicidad y efectos biológicos de nanopartículas de lecitina sobre células de cáncer de mama para evaluar su potencial uso como carriers de siRNA. Se usaron dispersiones de lecitina 2% p/v preparadas en buffers isotónicos (pH 5 y 7). Citotoxicidad y proliferación celular se evaluaron mediante el ensayo de MTT, en ausencia y presencia de suero. Altas concentraciones de lecitina en ausencia de suero resultaron citotóxicas, mientras que no lo fueron en presencia de suero para un amplio rango de concentraciones. No se observó inducción significativa de proliferación celular. La degradación de PC produce segundos mensajeros de señalización intracelular, por lo que se analizó activación y expresión de proteínas activadas por los mismos, como son Akt, Erk 1/2 y mTOR. Las nanopartículas se incubaron con células quiescentes durante 24hs y se analizó la fosforilación y contenido proteico de dichas proteínas. Bajas concentraciones de las dispersiones inducen fosforilación de estas proteínas pero no se vieron cambios en el contenido proteico de las mismas para ninguna de las concentraciones analizadas. Los ensayos de citotoxicidad sugieren que la transfección de siRNA requiere la presencia de suero. La inducción de la fosforilación de Akt, Erk1/2 y mTOR, evidenciaría el grado de captación celular de la PC y sugiere el uso de bajas concentraciones para la vehiculización de siRNA.