Rol del estrés oxidativo en un modelo animal de programación de hipertensión sensible a la sal inducido por la inhibición del sistema de endotelina durante el periodo postnatal temprano.

ORONEL, L; LORES-ARNAIZ, S; JENCQUEL, C; ORTIZ, MC; SUCHOWOLSKI, G; MAJOWICZ, MP; CZERNICZYNIEC, A; MAGNANELLI, A; ALBERTONI BORGHESE, MF

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 44° Reunión anual científica, Consejo Argentino de Hipertensión arterial; 2023

Previamente hemos demostrado que la inhibición del sistema de endotelina durante el periodo postnatal temprano (PPT) con Bosentan (20 mg/Kg/día), un inhibidor dual de los receptores de endotelina (ERA), conduce a un aumento significativo en los niveles de TBARS en homogenados de riñón de ratas macho neonatas, indicando un aumento en la peroxidación lipídica. Considerando este antecedente y dada la importancia del estrés oxidativo como uno de los mecanismos subyacentes a la programación de enfermedades durante el desarrollo, en el presente trabajo nos propusimos evaluar la producción de anión superóxido (O2?-), una especie activa del oxígeno, y evaluar la actividad de enzimas con acción pro- y anti-oxidante en fracciones mitocondriales crudas renales de ratas Sprague-Dawley de 7 días de vida. Para ello se estudiaron cuatro grupos experimentales: machos control (MC), machos-ERA (M-ERA), hembras control (HC) y hembras-ERA (H-ERA), en los cuales se determinaron: las actividades de Catalasa y Glutatión Peroxidasa (GPx) por métodos espectrofotométricos, la actividad de NADPH-Oxidasas (NOXs) por un método fluorométrico y la expresión de NOX-4 (principal isoforma renal) por Western Blot. Para el análisis estadístico se utilizó ANOVA de dos factores seguido del post-test de Bonferroni, siendo n=4.La producción de O2?- mostró una tendencia al aumento en las fracciones mitocondriales crudas renales del grupo M-ERA vs MC (13,27 ± 3,35 vs 8,68 ± 2,66 nmol/min.mg). La actividad de Catalasa en M-ERA fue significativamente menor respecto al grupo MC (p＜0,01), a diferencia de lo que sucedió en las hembras donde la actividad de Catalasa fue significativamente mayor en el grupo H-ERA vs HC (p＜0,05). Por otro lado, no se observaron cambios significativos en la actividad de GPx entre los diferentes grupos experimentales. Contrariamente a lo esperado, obtuvimos una tendencia a la disminución en la actividad de NOXs (232.294 ± 85.163 vs 359.738 ± 50.543 AU mg protein-1) y en la expresión de NOX-4 (1.0 ± 0.4 vs 1.3 ± 0.5 AU, cambio respecto al control) en M-ERA vs MC. Estos últimos resultados sugieren que la tendencia al aumento en la producción de O2?- en las fracciones mitocondriales crudas renales del grupo M-ERA, no se debería a un incremento en la expresión y/o actividad de NOX-4, sino que podría deberse a la contribución de otras enzimas pro-oxidantes presentes en la mitocondria como, por ejemplo, aquellas involucradas en la cadena de transporte de electrones (Complejo I, III), a una disminución de las defensas antioxidantes (por ejemplo, en la actividad de la Superóxido Dismutasa, SOD) y/o a un aumento en el aporte de especies activas del oxígeno por parte de los peroxisomas presentes en la fracción mitocondrial cruda estudiada. Por otra parte, la disminución en la actividad de Catalasa en el grupo M-ERA y su aumento en el grupo H-ERA (en comparación con sus respectivos controles), muestra una diferencia basada en el sexo, estando las hembras más protegidas frente a la inhibición del sistema de endotelina durante el PPT con relación a los machos.