IQUIFIB   02644
INSTITUTO DE QUIMICA Y FISICOQUIMICA BIOLOGICAS "PROF. ALEJANDRO C. PALADINI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de la region C-terminal sobre la estructura, la estabilidad y la dinámica de la frataxina humana
Autor/es:
ERNESTO A. ROMAN; SANTIAGO E. FARAJ; JAVIER SANTOS
Lugar:
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica
Resumen:
La ataxia de Friedreich (FRDA) es una enfermedad de herencia autosómica recesiva caracterizada por deterioro neurológico y miocardiopatía (1 en 50,000) causada por la deficiencia de la proteína frataxina (FXN). Esta proteína de ubicación mitocondrial está involucrada en forma directa en la transferencia de hierro a otras proteínas, particularmente a proteínas con centros Fe-S. En la mayor parte de los casos (95%) la deficiencia de FXN está provocada por expansión anormal de tripletes GAA en un intrón dificultando la trascripción del gen. En pacientes con FRDA se han identificado unas ~15 diferentes mutaciones, algunas de ellas afectan los sitios de unión a hierro, otras alteran la estabilidad termodinámica, y otras la tendencia a la agregación. Las variaciones en la región C-terminal (CTR) en los distintos homólogos se correlacionan con cambios en la estabilidad conformacional. Sin embargo, no se conocen los determinantes moleculares a nivel de residuo aminoacídico ni el rol de esta región en el plegado de la frataxina. En este trabajo proponemos el estudio de la variante truncada de la frataxina humana hFXN90-195 como modelo para investigar el rol de la CTR en la estabilidad y en la dinámica de la hFXN. El enfoque incluye un análisis por técnicas biofísicas, entre ellas, fluorescencia, dicroísmo circular, RMN, difracción de rayos X, DSC, DLS, ultracentrifugación analítica, proteólisis parcial y técnicas de simulación de la dinámica molecular. Nuestros resultados indican que (a) la ausencia del CTR no impide que la hFXN adquiera un plegado similar al nativo; (b) el CTR modula la estabilidad global de la hFXN; (c) el CTR modula la dinámica conformacional. En este contexto, también proponemos el estudio de otras variantes de FXN para comprender más profundamente las relaciones existentes entre estabilidad conformacional, dinámica y función. Para ello avanzamos con el estudio de una variante de FXN de un organismo psicrófilo (P. ingramii) que posee un 50% de identidad con respecto a la FXN de E. coli. En este caso observamos una fuerte modulación de la estabilidad termodinámica por el pH. En base a modelos por homología sugerimos la existencia de una red de interacciones polares que involucra residuos del core de la proteína.