El mecanismo de acción antitumoral de la 2’-nitroflavona involucra la participación de las vías de señalización de MAPK y la activación de la vía intrínseca de apoptosis en células de leucemia promielocítica aguda

CÁRDENAS MARIANO; MARDER, M; ROGUIN, L. P

Mar del Plata, Argentina

Congreso; 55º Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

SAIC, SAFIS, SAFE

En trabajos previos demostramos el efecto antitumoral del flavonoide sintético 2´-nitroflavona (2´-NF) en líneas celulares de leucemias y linfomas. Asimismo comprobamos que este compuesto induce cambios morfológicos típicos de una respuesta apoptótica en células de leucemia promielocítica aguda (HL-60). Con el fin de identificar las vías involucradas en la muerte celular, evaluamos la actividad de las caspasas -3, -8 y -9 en células HL-60 incubadas por distintos tiempos con una concentración 20 µM de 2´-NF.  Observamos un incremento máximo de 3,0 ± 0,5 veces en la actividad de la caspasa-3, y de 1,9 ± 0,2 y 3,5 ± 0,2 en la actividad de las caspasas -8 y -9, respectivamente. Por ensayos de Western Blot se evaluó la expresión de proteínas de la familia Bcl-2 y la liberación de citocromo c al citosol. Los resultados obtenidos luego de 6 h de incubación mostraron un aumento significativo en la expresión de Bax (1,5 ± 0,2) y en los niveles citosólicos de citocromo c (1,6 ± 0,2), sin cambios en la cantidad de Bcl-2 y Bcl-XL. Puesto que las proteína-quinasas activadas por mitógenos (MAPK) participan del balance entre las señales de proliferación y muerte celular, evaluamos si la 2´-NF modifica la actividad de las quinasas ERK 1/2, p38 y JNK. Mientras que la defosforilación de ERK 1/2 fue evidente después de 15 minutos de tratamiento con 2´-NF, la fosforilación de p38 y JNK alcanzó niveles máximos luego de 15 y 30 minutos, respectivamente (1,4 ± 0,2 y 7,3 ± 0,4). Los resultados obtenidos indican que la 2´-NF induce la activación de las vías p38 y JNK, relacionadas con procesos de muerte celular, y la inhibición de la cascada ERK 1/2, generalmente asociada a señales de proliferación y sobrevida. Además, la vía intrínseca de la apoptosis interviene en el mecanismo de acción antitumoral de este compuesto. Aunque observamos un aumento en la actividad de la caspasa-8, queda aún por confirmar la participación de la vía extrínseca en la respuesta apoptótica inducida por la 2’-NF.