Informe de Campaña Banco Burdwood/Namuncurá - Tierra del Fuego) 1-17 diciembre 2015

ANDREA MALITS

2015-12-01/2015-12-17

25-32

Biológica

Rec.Hidr.-Cuencas oceanicas

Funcionamiento de la red trófica microbiana con énfasis en el papel de la lisis vírica como factor de mortalidad procariota en el Área Marina Protegida Namuncurá/Banco Burdwood (Atlántico Sudoccidental), Canal Beagle y aguas aledañas:El objetivo general es continuar los estudios sobre aspectos microbianos que incluyan factores que afecten la producción y mortalidad de microorganismos, su interacción con los parámetros fisicoquímicos y sus implicaciones para los flujos biogeoquímicos en el AMP N/BB y aguas aledañas que se iniciaron en primavera 2014 a bordo del B/O Puerto Deseado. Objetivos específicos:1.Determinar la biomasa autótrofa y las concentraciones de nutrientes inorgánicos disueltos en el AMP N-BB y zonas aledañas para caracterizar el estado trófico de las masas de agua.2.Determinar las variaciones espaciales de las abundancias de microorganismos (pico/nanoplancton autótrofo, nanoflagelados heterótrofos, procariotas heterótrofas y virus) y relacionarlas con los parámetros físico-químicos y la biomasa autótrofa.3.Evaluar el papel de la lisis vírica para el control de la biomasa procariota en estaciones selectas (Canal Beagle, AMP N-BB y áreas aledañas) y relacionar la variabilidad espacial de la lisis vírica con los parámetros físico-químicos y el estado trófico de las masas de agua.Metodología:En 16 estaciones se tomaron muestras de agua subsuperficial (10m/15m de profundidad) mediante una botella Niskin de 5L y en seis de ellas aguas más profundas (25-100m) para obtener los parámetros que se detallen a continuación.1. Concentración de clorofila:Para los análisis de clorofila, se filtraron 2-4L sobre filtros Whatman GF/F (47mm) que se guardarán a -20 ºC hasta su procesado. Los pigmentos fotosintéticos se extrajeron en acetona 90% durante 24h y se determinaron con un espectrofotómetro según Strickland & Parsons en el CADIC.2. Abundancia de microorganismos:Submuestras para la abundancia, biomasa y composición (grandes grupos taxonómicos y funcionales) de pico-/nanoplancton fototrófico, nanoflagelados heterótrofos (5mL, respectivamente), procariotas y virus (1mL, respectivamente) fueron fijadas con glutaraldehido, previamente filtrado por 0.2µm, a una concentración final de 0.5% (excepto para el pico/nanoplancton fototrófico, cual era 0.1%), incubadas 20-30 minutos a 4ºC, a continuación congeladas en nitrógeno líquido y almacenadas a -20ºC para su posterior análisis por citometría de flujo.3. Mortalidad procariota por lisis vírica:La producción vírica lítica (VPl), la fracción de células infectadas (FIC) se estimaron mediante una técnica de dilución que se basa en el principio de reducir la abundancia de virus para impedir nueva infección. Entonces, los virus producidos son de células ya infectadas. Los procariotas fueron incubados en agua libre de virus en tubos de 50mL por triplicado durante 9 horas a la temperatura in situ y en oscuridad. Inmediatamente (t0) y cada 3 horas se tomaran muestras para las abundancias víricas y de procariotas que fueron fijadas con glutaraldehido (0.5% concentración final), incubadas 20-30 minutos a 4ºC y, a continuación, congeladas en nitrógeno líquido y almacenadas a -20ºC para su posterior análisis con citometría de flujo. Para obtener la tasa de lísis vírica, la producción vírica corregida por la abundancia de procariotas in situ se divide por el Burst size, es decir dividiendo el numero de virus producidos por el declive de la abundancia de procariotas durante las primeras horas de incubación. El carbono orgánico liberado durante la lísis vírica se calcula con el factor de 12.4 fg C celula-1. La fracción de mortalidad de procariotas debido a la lísis vírica se estimará según el modelo de Binder, VMM = FIC/LN(2) x (1 - 0.186 - FIC)4. Absorbancias:Para el estudio cualitativo de la MOD se obtuvieron las características ópticas de las muestras de agua pre-filtradas por filtros de fibra de vidrio Whatman GF/F con un espectrofotómetro Cintra 10e (GBC) UV-Vis con un escaneo continuo entre 200 y 800nm longitud de onda y las absorbancias de longitud de onda especificas a 250nm, 254nm, 365nm y 440nm. La absorbancia a 254nm da una estima de la concentración de materia orgánica en el agua. El cociente entre las absorbancias a 250nm y 365nm da el valor del índice E2:E3 que es una estima de la cantidad relativa de la MOD según su peso molecular; el índice aumenta con el aumento de la fracción del MOD de bajo peso molecular. El coeficiente de absorción a 440nm (g440) indica el contenido de sustancias húmicas en el agua.