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Conocer la distribución de especies es un paso esencial para estudiar la biodiversidad de los ecosistemas siendo además una herramienta para diseñar estrategias de manejo de especies exóticas. En Tierra del Fuego (TDF), se han introducido y establecido poblaciones de trucha marrón (Salmo trutta), de arroyo (Salvelinus fontinalis), arcoíris (Oncorhynchus mykiss) y recientemente, de salmón chinook (O. tshawytscha). Actualmente, estas especies conviven con las pocas especies nativas presentes como puyen chico (Galaxias maculatus), puyen grande (G. platei) y lamprea (Geotria australis). Al determinar distribución de especies, pueden presentarse complicaciones como la dificultad de acceso al sitio para desarrollar tareas de muestreo convencionales o la presencia de poblaciones relictuales donde la probabilidad de detección es baja. El ADN ambiental (ADNa) es un método no invasivo de documentación de especies que se basa en la detección de fragmentos de ADN en muestras tomadas del ambiente. Para detectar especies acuáticas, el ADNa se obtiene por filtración de muestras de agua y posterior amplificación de fragmentos por PCR. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método basado en ADNa para determinar presencia y distribución de especies de peces en ríos de TDF. En primer lugar, se extrajo ADN de todas las posibles especies presentes en TDF para poner a punto la técnica de PCR con oligonucleótidos específicos. Luego, se realizó un ensayo en cautiverio para poner a punto el método de filtrado y extracción de ADNa. Finalmente, se tomaron muestras de agua de diferentes ríos a la vez que se utilizó electropesca en los mismos sitios para detectar especies por observación directa. El número de especies detectado a través de ADNa fue igual o mayor que el detectado por observación directa. Incluso en sitios en donde no se detectó ninguna especie por observación directa, sí fue posible hacerlo a través de ADNa.