Sexado molecular de cérvidos sudamericanos a partir de genotipado de muestras no invasivas.

RAIMONDI, VANINA B.; GOMEZ FERNANDEZ, M.J; FAMELI, ALBERTO; MIROL, PATRICIA

Buenos Aires

Congreso; II Congreso Latinoamericano de Mastozoología, XXVJornadas Argentinas de Mastozoología; 2012

Sociedad Argentina para el Estudio de los Mamíferos

La asignación tradicional del sexo en cérvidos se basa en su visualización, ya que el dimorfismo sexual se caracteriza principalmente por la presencia de cornamenta en los machos. Sin embargo, en especies, elusivas y amenazadas, el muestreo no invasivo, independiente del avistaje de los individuos, constituye actualmente la principal fuente de colección para estudios genéticos y ecológicos. Por lo tanto es indispensable contar con un método de sexado a partir de dichas muestras. El objetivo de este trabajo fue desarrollar y poner a prueba en muestras no invasivas una técnica de diferenciación entre sexos mediante la amplificación del gen Amelogenin, presente en los cromosomas sexuales. A partir de muestras de sexo conocido de pelo, hueso, piel y materia fecal de Ozotoceros (n=12), Blastoceros (n=4) y Mazama (n=7), se realizaron amplificaciones con primers diseñados para muestras no invasivas de ungulados. Se utilizó el método de la cola universal de M13, marcando el primer correspondiente con un fluoróforo (TMR, HEX o FAM). Además, se analizaron 22 heces de sexo desconocido de Ozotoceros. Todos los fragmentos fueron secuenciados, encontrándose variabilidad nucleotídica entre los diferentes géneros. El genotipado resultó en todos los casos en un alelo de 236 pb para las hembras y dos de 192 y 236 pb para los machos. La proporción de alelos falsos/alelos nulos fue: Ozotoceros: 0,007/0, Blastoceros: 0/0,22 y Mazama: 0,125/0,25. El porcentaje de éxito en heces de sexo desconocido fue de alrededor del 70%. En todos los casos de sexo conocido el alelo nulo se correspondió con el fragmento de mayor tamaño, lo cual puede ser una consecuencia del uso de muestras no invasivas. Este es el primer trabajo de determinación molecular del sexo en ciervos sudamericanos, que además permite combinar el sexado con sets de microsatélites, resultando en una técnica más económica y rápida que las convencionales.