Bioquimico

TECNICO ASISTENTE

Capacitación e instrucción en la obtención de muestras en condiciones óptimas para extracción y purificación de ARN. Estas muestras pueden provenir de distintas áreas cerebrales, así como también de cultivo celular. Se implementará una nueva técnica de purificación del ARN total proveniente de dichas muestras, utilizando columnas de afinidad (Direct-zol RNA miniprep kit). También se llevará a cabo el análisis de cantidad y pureza del ARN obtenido utilizando un espectrofotómetro (Nano-Drop ND-2000). Iniciación en la obtención de ADNc de las muestras de ARN a través de retrotranscripción para poder realizar el estudio de expresión génica por qPCR, utilizando la enzima Transcriptasa Reversa M-MLV (Promega) en condiciones específicas de reacción. Finalmente, seré capacitado para analizar las muestras de cDNA utilizando la metodología qPCR/Syber Green Master Mix (Thermo Fisher) y en el manejo del equipo, así como también en la determinación de la cantidad de ADNc por reacción, concentración de primers y las condiciones óptimas de amplificación y de determinar la eficiencia de amplificación de cada primer específico realizando curvas de calibración generadas a través de diluciones seriadas de ADNc de muestras control. En el marco de nuevo proyectos de los diferentes grupos del instituto se realizarán tareas similares a las reportadas durante el último periodo: Disección de estructuras cerebrales (Hipocampo dorsal y ventral, Amigdala basolateral, Corteza prefrontal infra límbica/pre límbica) para posterior realización de un ensayo de biotinilización de la subunidad GluA2 del receptor AMPA en superficie mediante técnica de western blot. Perfusión intra-cardíaca de animales de laboratorio (ratas wistar) con una solución modificada de líquido cefalorraquídeo artificial para posterior preparación de rebanadas cerebrales mediante cortes de vibratomo. Las mismas serán utilizadas para experimentos de electrofisiología. Perfusión intracardíaca de animales de laboratorio (ratas wistar) con PFA al 4%  para inmunofluorescencia contra marcadores de terminales glutamatergicos (v-Glut/PSD-95). Corroboración histológica de implantes intracraneales mediante cortes con criostato y tinción de los cortes con cresyl violeta. Preparación de Mezcla de Sales y Mezcla de Vitaminas Solubles empleadas en la elaboración de las dietas Control e Hipo-calorica. Elaboración de ambas dietas, Control e Hipo-calórica. Elaboración de los ?pellets? de cada tipo de dieta (con los cuales se alimenta a las hembras preñadas desde la segunda semana de gestación y a las crías hasta que se produce el destete a los 30 días de edad). Experimentos de Histología e Inmunohistoquímica: marcadores de inflamación neuroglial. Experimentos de Wester Blot de marcadores mitocondrial, autofagicos y lisosomales en distintas estructuras cerebrales.

MARTIJENA, IRENE DELIA / INV INDEPENDIENTE

[IFEC] INSTITUTO DE FARMACOLOGIA EXPERIMENTAL DE CORDOBA -
[CCT CORDOBA] CENTRO CIENTIFICO TECNOLOGICO CONICET - CORDOBA -
[CONICET] CONSEJO NACIONAL DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Y TECNICAS -