Megámeros (MG): ¿Un nuevo nano-sistema de delivery?

SCHILRREFF PRISCILA; LILLO ROLANDO CRISTIAN RODRIGO; ROMERO EDER LILIA; MORILLA MARÍA JOSÉ

Cancún

Congreso; XLII CONGRESO NACIONAL DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS; 2009

Megámeros (MG): ¿Un Nuevo nano-sistema de delivery? Schilrreff Priscila, Lillo Rolando Cristian Rodrigo, Romero Eder Lilia and Morilla María José NANOMEDICINE RESEARCH PROGRAM (NRP), Departamento de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes Introducción: Los polipéptidos u oligopéptidos han demostrado gran potencial terapéutico a nivel clínico, pero su pobre biodisponibilidad, debida fundamentalmente a las defensas naturales del cuerpo humano así como a los mecanismos digestivos, lleva a requerir frecuentes administraciones por vías parenterales. La corta vida media en plasma y los pobres resultados obtenidos luego de repetidas administraciones parenterales de estos agentes, muestran la importancia de contar con nuevas estrategias de delivery que involucren vías de administración amigables, como por ejemplo la vía oral. Para posibilitar la administración oral de polipéptidos es necesario mantener su estructura química durante el tránsito a través del tracto gastrointestinal, su muchoadhesión y el incremento del transporte paracelular en los enterocitos. Para ello, proponemos a los megámeros (MG) -nanosistermas formados por dendrímeros-, polímeros nanométricos de estructura controlada y elevada actividad superficial, para emplearse como sistemas de delivery para la vía oral de polipéptidos. Objetivo: Disponer de un nano-sistema de delivery cuyo objetivo final sea posibilitar la administración de polipéptidos por vía oral. Material y método: La síntesis de MG, core-shell (tecto) dendrímeros saturados, involucra la autoasociación por neutralización electrostática de una limitada cantidad de dendrímero core catiónico (dendrímero PAMAM de generación (G) 5 de grupos superficiales amina), con un exceso de reactivo de cubierta aniónico, de grupos superficiales carboxilo, G 2,5, con la subsiguiente formación de enlaces covalentes. El producto resultante se purificó mediante cromatografía de exclusión molecular (CEM) y se liofilizó obteniendo un solido blanco cristalino. La formación de los MG se determinó por: a) SDS-PAGE (Electroforesis en Gel de PoliAcrilamida) b) Cromatografía liquída de alta performance (HPLC) c) CEM d) Tamaño, polidispersidad y potencial Z que se evaluó mediante NanoZ sizer y e) Análisis Termogravimétrico. Se llevaron a cabo estudios de citotoxicidad in vitro sobre células Caco-2 (tipo enterocitos), por el método de formazán. Finalmente, se determinó el tránsito de los MG marcados con FITC (isotiocianato de fluoresceina) al incubarlos con cultivos de células Caco-2. Resultados y Discusión: Los MG demostraron ser estructuralmente estables, monodispersos, con una distribución de tamaño de 8 ± 1.5 nm y un PM 95000 Da. A su vez, luego de marcados con FITC demostraron atravesar la barrera epitelial al incubarlos con células Caco-2, en ausencia de citotoxicidad. Conclusiones: La fabricación de los megámeros pudo llevarse a cabo mediante pasos extremadamente sencillos, que no requieren de las complejas estrategias de síntesis divergente/convergente como sucede con los dendrímeros. Los diversos estudios realizados demostraron la existencia de una estructura de tamaño, carga superficial, movilidad electroforética, cromatográfica y citotoxicidad distinta a la de los precursores utilizados para su síntesis. Finalmente, su conformación, flexibilidad, elevada actividad superficia y el tránsito de los mismos  a través de la barrera epitelial, los marca como posibles nano-sistemas que puedieran inducir el delivery de polipéptidos en ellos incluidos.