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Introducción: CNBP es una proteína fundamental en el desarrollo de las estructuras cráneofaciales durante la embriogénesis de vertebrados1. Une ácidos nucleicos simple hebra (reconoce regiones ricas en Guaninas) y presenta actividad chaperona de ácidos nucleicos2. Su estructura primaria consta de 7 nudillos de Zinc del tipo CCHC, entre el primer y segundo nudillo de zinc se encuentra una caja del tipo RGG; ésta y el primer nudillo de zinc son esenciales para su actividad3. Objetivos: Purificar CNBP y determinar la importancia de la presencia de Zinc en su estructura y actividad de unión a ácidos nucleicos. Resultados: El vector Trx-CNBP produce fusiones traduccionales de CNBP a Tioredoxina e Histidina. Se llevaron a cabo dos protocolos de purificación en los cuales Trx-CNBP fue inducido en presencia y ausencia de Zinc. En la purificación se realizaron dos cromatografías de afinidad al Níquel. Por espectroscopia de absorción electrónica se determinó que CNBP co-purificaba con ácidos nucleicos cuando era inducida con Zinc. Una cromatografía de intercambio iónico permitió separar las proteínas acomplejadas con ácidos nucleicos de las que no. La actividad de la CNBP fue evaluada mediante ensayos de retardo de la movilidad electroforética (EMSAS) y se observó que las proteínas inducidas con Zinc presentaban una mayor afinidad a las sondas ensayas (DNA simple hebra y RNA) a su vez, mostraban una mayor estabilidad a la autoproteólisis. Mediante la incubación con EDTA se queló el Zinc de CNBP, estas proteínas perdieron actividad de unión a los ácidos nucleicos y fueron más susceptibles a la degradación de proteasas. Conclusiones: Se logró optimizar un protocolo para la purificación de CNBP y se determinó que la presencia de zinc durante la inducción favorece el foldeado de la misma y como consecuencia es más activa y estable. La presencia de zinc en los nudillos de CNBP es fundamental para una proteína estructurada, activa y estable. Referencias: 1. Weiner, A. M., Allende, M. L., Becker, T. S., and Calcaterra, N. B., J.CellBiochem., 102, 1553-1570 (2007) 2. Armas P., Nasif S., and Calcaterra N. B., J.CellBiochem., 103 (3), 1013-1036 (2008) 3. Armas, P., Aguero, T. H., Borgognone, M., Aybar, M. J., and Calcaterra, N. B., J Mol.Biol., 382, 1043-1056 (2008)