INVOLVEMENT OF BUFO ARENARUM INTEGRINS IN THE SIGNALING CASCADE ACTIVATED BY FERTILIZATION

MOUGUELAR, VALERIA; COUX, GABRIELA

Buenos Aires

Congreso; XII JORNADAS ANUALES DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGÍA; 2010

SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGÍA

La incubación de ovocitos de B.arenarum con el péptido RGDS (motivo reconocido por integrinas)provocó una disminución significativa en los valores de fecundación sugiriendo un rol para estasproteínas en la fecundación. Nuestros objetivos fueron: i) estudiar el efecto de un anticuerpopoliclonal contra la subunidad 1 integrina (M-106) en el proceso de fecundación ii) analizar el efectodel tratamiento con RGDS sobre el ovocito. El efecto del anticuerpo M-106 se evaluó medianteensayos de fecundación in vitro en presencia de M-106 (50 g/ml) o de un anticuerpo control. Laactivación del ovocito se evaluó mediante análisis macroscópico (elevación de la envoltura vitelina) yestudiando el estado de fosforilación de p42-MAPK. Aislamos fracciones de membrana plasmática ycitosólicas a partir de ovocitos, ovocitos tratados con RGDS y huevos 1 y 10 minutos postfecundacióny analizamos los patrones de fosforilación en tirosina de estas fracciones mediantewestern blot. El anticuerpo M-106 provocó una inhibición significativa de la fecundación (100,5 + 4,3vs. 58,5 + 2,1%, p<0.05). El tratamiento con el péptido RGDS no provocó la activación de los ovocitospero indujo fosforilaciones en tirosina, mimetizando parcialmente los cambios en el patrón defosforilación en tirosina inducidos por la fecundación. Estos resultados sugieren que las integrinaspresentes en el ovocito (en particular la subunidad 1) están involucradas en la fecundación y debidoa que el péptido RGDS es un motivo que interactúa con integrinas, nuestros resultados indican queestas proteínas son miembros de la cascada de señalización que se desencadena luego de lafecundación.