Análisis funcional del factor de transcripción Tiny inducido por estrés oxidativo en Arabidopsis thaliana

FREA VANESA; ZANOR MARÍA INÉS; VALLE ESTELA MARTA; SCARPECI TELMA ELEONORA

Rosario

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2010

Sociedad de Biología de Rosario

Para las plantas el oxígeno es un arma de doble filo. Es esencial para el crecimiento y desarrollo pero la exposición continua al oxígeno puede dar lugar a daño celular y, en última instancia, a la muerte. Esto se debe a que la molécula de oxígeno se reduce continuamente dentro de las células dando origen a las especies reactivas de oxígeno y un desbalance entre la generación y la eliminación de las mismas origina el estrés oxidativo. Uno de los objetivos planteados en nuestro grupo de trabajo fue el de realizar un estudio del perfil transcripcional de plantas de Arabidopsis expuestas durante 2 horas a condiciones de estrés oxidativo utilizando una solución 50 μM metil viológeno (MV). Este experimento se llevó a cabo haciendo uso de la tecnología de microarreglos de oligonucleótidos y el mismo dio como resultado la inducción de más de 600 genes de expresión temprana entre los que se encuentran el factor de transcripción Tiny (At1g22810). Este resultado se corroboró por medio de un northern blot, utilizando muestras de ARN provenientes de plantas de Arabidopsis Col 0 tratadas durante 0, 2, 4, 6 y 24 horas con 50 μM MV. La expresión de Tiny fue máxima entre las 4 y 6 horas de tratamiento con MV, no observándose su expresión en los controles sin tratamiento. Con el objeto de analizar la función que cumple Tiny en la planta, se generaron líneas de Arabidopsis que expresan altos niveles de dicho factor de transcripción. Estas plantas se caracterizaron fenotípicamente y se realizó además un análisis a nivel de transcriptos de las mismas utilizando la técnica de PCR en tiempo real. Por otro lado, se utilizaron una serie de herramientas disponibles en la base de datos de microarreglos BAR para analizar la expresión in silico del gen Tiny durante el desarrollo, en distintos tejidos de la planta y bajo estrés biótico y abiótico. Los datos mostraron una baja expresión de este factor de transcripción en distintos tejidos de la planta y bajo condiciones normales de crecimiento y un aumento en los niveles de transcriptos en las raíces de plantas tratadas durante 3 horas con 150 mM NaCl y en hojas infiltradas con un elicitor bacteriano (flagelina 1 μM, 1 hora). Estos datos sugieren que el gen Tiny se expresaría en forma temprana bajo condiciones de estrés oxidativos de origen biótico y abiótico.