IBR 13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis del estado físico del ADN del papilomavirus tipo 16 por PCR en tiempo real
Autor/es:
ALVAREZ GÖDEKEN, ANDRÉS; MAMPRÍN D´ANDREA, RUBÉN; BERCOFF, MAYARÍ; CHOUHY, DIEGO; CAVATORTA, ANA L.; GIRI, ADRIANA A
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XI Congreso y XXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario.; 2009
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Rosario
Resumen:
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La infección con papilomavirus humanos (HPV) oncogénicos es considerada el factor necesario
para el desarrollo de cáncer cervical. Los HPV son virus sin envoltura con
genoma de ADN doble hebra circular de aproximadamente 8 kb. Los HPV
oncogénicos, como el HPV-16, integran su ADN al genoma celular a través de la
ruptura de la región E1/E2 de HPV. E2 codifica para una proteína que regula la
transcripción viral y su pérdida permite la expresión de los oncogenes virales,
E6 y E7, y el inicio de la transformación celular. Por lo tanto, la integración
del ADN viral en el genoma celular es considerada un evento clave en la
carcinogénesis asociada a HPV. En base a estas
consideraciones se ha propuesto al estado físico viral (presencia de formas
integradas, episomales o mixtas) como una información de utilidad para definir
el pronóstico de progresión del cáncer cervical y su resolución. Hemos desarrollado un método cualitativo para
la co-amplificación de los genes E2 y E6 del HPV-16 que combina PCR, hibridación
liquida con sondas específicas y revelado colorimétrico. El cociente E2/E6 como
estimación del estado físico del ADN viral se obtiene a partir de los valores
de densidad óptica obtenidos con cada sonda. En este análisis determinamos que
el estado físico de HPV-16 se correlacionaba en un 67% con la evolución
clínica. Para verificar los resultados obtenidos optimizamos una metodología de
PCR en tiempo real y comparamos los cocientes E2/E6 arrojados por cada metodología
obteniendo valores relativos similares. En conclusión, hemos
validado el ensayo PCR-16 E2/E6 como un método alternativo, de bajo costo y
fehaciente para la evaluación del estado físico del ADN del HPV-16.
Financiamiento:
FIC (5 D43 TW001037), CONICET (PIP 6376)
y ANPCyT (PICT 05-25464)
Este trabajo ha sido seleccionado para su presentación en las
XVII JORNADAS DE JOVENES INVESTIGADORES
de la Asociación
de Universidades Grupo Montevideo (AUGM), que se realizarán del 27 al 29 de
octubre de 2009 en Concordia, Entre Ríos, Argentina.
