IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
The protein TcHTE of Trypanosoma cruzi is involved in heme transport
Autor/es:
LUCAS PAGURA; JULIA A. CRICCO; MARCELO L MERLI; BRENDA A. CIRULLI
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Conferencia; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2016
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
Trypanosoma cruzi carece de todas las enzimas de la vía de biosíntesis de hemo, por lo que debe incorporarlo desde los diferentes hospedadores durante su ciclo de vida. En nuestro laboratorio estamos interesados en elucidar los mecanismos de transporte de hemo en el parásito. En estudios previos hemos utilizado diferentes análogos fluorescentes de hemo (HAs, derivados de protoporfirinas y mesoporfirinas), para caracterizar los estadios donde ocurre el transporte. Dichos compuestos no pueden ser metabolizados por el parásito y produjeron diferentes efectos en el crecimiento de epimastigotes. Estos resultados indicaron que T. cruzi es capaz de incorporar selectivamente estos análogos durante los estadios replicativos (epimastigote y amastigote) pero no en el estadio infectivo (tripomastigote), sugiriendo que el trasnporte de hemo procede principalmente durante los estadios replicativos (Merli, 2016).Recientemente hemos identificado a la proteína TcHTE, que se localiza en el bolsillo flagelar del parásito, la cual estaría involucrada en el transporte de hemo (Merli, 2016). La presencia y abundancia de TcHTE en epimastigotes se vio afectada por la disponibilidad de hemo en el medio de cultivo, detectada por ensayos de Western blot utilizando anticuerpos específicos para la proteína en extractos totales de epimastigotes crecidos en 0, 5 y 20 μM de hemina. También la presencia de HAs afectó selectivamente la presencia de de TcHTE en epimastigotes. Los niveles de transcripto del gen que codifica para TcHTE se evaluaron en epimastigotes por qPCR observándose que estos fueron afectados por la disponibilidad de hemo en el medio de cultivo, siendo mayor a menor concentración de hemina en el medio. Por otro lado, TcHTE pudo ser detectada principalmente en los estadios de epimastigotes y amastigotes, donde se produciría transporte de hemo, y en menor grado en tripomastigotes. Los resultados obtenidos indican que T. cruzi presenta un sistema selectivo para el trasnporte de hemo y que dispondría de algún mecanismo intracelular para detectar los niveles de hemo intracelular (que dependerá de la disponibilidad en el medio), regulando los niveles del transcripto de TcHTE como así también los niveles de proteína presente para optimizar el transporte del cofactor. Merli ML, Pagura L, et al. (2016) The Trypanosoma cruzi Protein TcHTE Is Critical for Heme Uptake. PLoS Negl Trop Dis 10(1): e0004359. doi:10.1371/journal.pntd.0004359.