IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis funcional y trancripcional del locus scs que codifica para proteínas tipo tiorredoxinas periplasmáticas de Salmonella entérica
Autor/es:
SONCINI, F. C.; CHECA, S. K.; LOPEZ MC
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología y XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016
Institución organizadora:
Asociación Latinoamericana de Microbiología y Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
Las tiol/disulfuro oxidorreductasas periplasmáticas participan en la formación e isomerización de puentes disulfuro y contribuyen a la virulencia de invasividad de microorganismos patógenos, y en su mayoría han sido muy poco caracterizados. Salmonella enterica cuenta con al menos cinco de estos sistemas, entre ellos ScsABCD, que es específico de este patógeno y que fue identificado inicialmente por su capacidad de conferir tolerancia a cobre en mutantes sensibles a dicho metal de E. coli. El cobre, esencial pero tóxico a altas concentraciones, tiene la capacidad de donar o tomar un electrón y de afectar particularmente los grupos tioles de proteínas, generando estrés redox. En nuestro laboratorio estamos caracterizando mecanismos involucrados en la defensa de S. enterica al exceso de cobre y, en particular, nos interesa dilucidar la contribución del sistema ScsABCD en este proceso, así como en la tolerancia a otras especies generadoras de estrés redox en el periplasma. Comparamos la sensibilidad a cobre y a peróxido de hidrógeno de la cepa silvestre, con una mutante en la que se eliminó el operón scsABCD completo por deleción y con mutantes individuales en cada uno de los genes del operón, en diferentes condiciones de cultivo. Observamos que todos los componentes contribuyen en mayor o menor medida a incrementar la sobrevida de la bacteria en estas condiciones. Investigamos también la contribución de los otros sistemas de formación e isomerización de puentes disulfuro de Salmonella a la tolerancia a cobre. Además, medianteanálisis transcripcionales y la generación de reporteros cromosomales, determinamos que los genes scs se inducen como consecuencia de la exposición de la bacteria a concentraciones subletales de cobre y que su expresión depende del sistema de dos componentes CpxR/CpxA, de respuesta a estrés de envoltura. Verificamos además que la regulación es directa e identificamos el sitio de reconocimiento del regulador de respuesta CpxR en el promotor scsABCD mediante ensayos de retardo de la movilidad electroforética y de huella dactilar con DNasaI, así como mediante mutagénesis sitio‐dirigida sobre el sitio de unión. Nuestros resultados contribuyen a dilucidar las estrategias desarrolladas porbacterias patógenas, tales como Salmonella para sobrevivir en entornos hostiles y nos permiten vincular a los sistemas de balance redox periplasmáticos con la homeostasis de cobre.