LA SOBREEXPRESIÓN DEL FACTOR NUCLEAR TCHMGB EN T. CRUZI POSEE UN EFECTO DELETÉREO EN LA REPLICACIÓN E INVASIÓN CELULAR

SERRA ESTEBAN; LUIS TAVERNELLI; CRIBB, PAMELA

Santa Fe

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias y SIMPOSIO Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas; 2016

Sociedad Argentina de Protozoologia

Trypanosoma cruzi es un protozoo flagelado y el agente causal de la Enfermedad de Chagas. A diferencia de otros organismos eucariotas, T. cruzi presenta una organización yregulación genómica particular. La mayoría de sus genes se encuentran organizados en clústers policistrónicos los cuales son transcriptos desde unidades genómicas descriptascomo SSR (strand switch regions). T. cruzi carece de la mayoría de los factores de transcripción basales canónicos necesarios para dirigir la regulación transcripcional. Dada la faltade información con respecto a esto, es necesario ampliar el conocimiento sobre factores nucleares involucrados en el proceso de regulación genómica. Las proteínas ?High MobilityGroup? (HMG) son proteínas nucleares no histonas muy abundantes. Estas interaccionan con la cromatina en una forma dinámica, jugando un rol importante en la ejecución ycontrol de funciones nucleares, influyendo en distintos fenotipos celulares, capaces de distorsionar, curvar o modificar la estructura del ADN en la cromatina.En nuestro laboratorio se identificó y caracterizó una proteína homóloga de HMGB en Trypanosoma cruzi, llamada TcHMGB. Al igual que HMGB1 de mamíferos, la proteína tienedos dominios de unión al ADN (HMG-Box), pero en lugar de una secuencia carboxilo terminal típica acida, posee una región amino terminal, única para las HMGBs detripanosomátidos. Estudios in sílico sugieren que esta secuencia contiene una señal de localización nuclear (NLS) y un dominio "DEK-C dominio terminal?. Este junto con el dominioHMG-box son capaces de unirse al ADN de forma independiente entre sí.Dadas las propiedades "arquitectónicas" de TcHMGB, las características particulares de la transcripción en tripanosomátida y la evidencia recogida sobre mecanismosepigenéticos que controlan la expresión génica, decidimos evaluar el rol de TcHMGB en T. cruzi. Nuestra hipótesis de trabajo es que el enriquecimiento de TcHMGB en ciertasregiones del genoma, podría establecer zonas de la cromatina más abierta y por lo tanto mas accesible a la maquinaria transcripcional, trabajando en conjunto con otras "marcas"epigenéticas.La proteína TcHMGB fusionada a dos tag de Hemaglutinina (HA2) se clonó en el vector pTcINDEX-GW el cual es inducible por tetraciclina y se seleccionaron transfectantesestables con dicha construcción.