IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LA MUTACIÓN DE LA SER908 EN EL TRANSPORTADOR CANALICULAR MRP2 PREVIENE SU ENDOCITOSIS INDUCIDA POR LA ACTIVACIÓN DE PROTEÍN QUINASAS C CLÁSICAS (CPKCS). IMPLICANCIA EN COLESTASIS POR ESTRÓGENOS
Autor/es:
GUILLERMO NICOLÁS TOCCHETTI1; AGOSTINA ARIAS1; PAIBOON JUNGSUWADEE2; JUAN PABLO RIGALLI1; SILVINA STELLA MARIS VILLANUEVA1; MARÍA LAURA RUIZ1; CLAUDIA BANCHIO; MARY VORE2; ALDO DOMINGO MOTTINO1
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; SAIC; 2015
Resumen:
MRP2 contribuye a la formación de la bilis al secretar glutatión y susderivados al canalículo biliar. La activación de cPKCs es en parteresponsable de la colestasis generada por derivados de estrógenoscomo el 17-glucurónido de estradiol (E17G). Hemos demostrado enratas y en la línea celular hepática de origen humano HepG2 que elmecanismo involucra endocitosis de MRP2 con consecuente pérdidade actividad. En este trabajo evaluamos si la endocitosis de MRP2puede asociarse a un aumento en el grado de fosforilación deltransportador debido a la activación de cPKCs. Para ello, se incubaroncélulas HepG2 con timeleatoxina (TTX, 100 nM, 30 min), un activadorselectivo de cPKCs, resultando en incremento de fosforilación deresiduos de serinas en MRP2, sustratos de cPKCs(inmunoprecipitación seguida de inmunoblot). Mediante un analisis insilico identificamos a la Ser908, ubicada en la región citosólica queconecta dos dominios transmembrana contiguos de MRP2 (regiónlinker), como posible blanco de cPKCs. Sobreexpresamos GFP-MRP2salvaje o una variante en la que se reemplazó la Ser908 por un residuode Ala (A908SGFP-MRP2), y evaluamos el efecto de TTX sobre elcontenido de GFP-MRP2 en membrana plasmática (MP) vsintracelular (MI) por inmunoblot. GFP-MRP2 salvaje disminuyó en MP(-74%) y aumentó en MI (+113%) en respuesta a TTX (n=4; p