Aislamiento e identificación de nuevas bacterias oxidantes de Manganeso (II)

CIANCIO L; PIAZZA A; PACINI V; SANGUINETTI G; INGALLINELLA AM; OTTADO J; GOTTIG N

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2015

La presencia de altas concentraciones de Manganeso (Mn) en aguas subterráneas de consumo humano es un problema ampliamente distribuido en Argentina y en el mundo, ya que afecta su calidad desde el punto de vista de aceptabilidad, operativo y sanitario.En los últimos años, los métodos de remoción biológica de Mn han cobrado fuerza debido a su alta eficiencia y bajo costo. La biooxidación de Mn ha sido adjudicada a diversas bacterias tales como Leptothrix discophora, Pseudomonas putida y Bacillus spp., entre otras. Esta amplia variedad filogenética refleja la diversidad fisiológica de las bacterias oxidantes de Mn (II) (BOMn) y, aunque la función de la oxidación biológica de Mn (II) continúa siendo enigmática, la presencia generalizada de óxidos de Mn en una miríada de nichos ecológicos sugiere que la diversidad microbiana es aún mucho mayor. Este trabajo tiene como objetivo el aislamiento e identificación de nuevas BOMn provenientes de las plantas de tratamiento de remoción biológica de Hierro (Fe) y Mn (BioCIS-UNR®) ubicadas en la provincia de Santa Fe. Para la selección de BOMn,se buscó en la literatura medios de cultivo apropiados y finalmente se decidió trabajar con tres:?PC?, ?Lept? y ?Mn?. En estos medios, la capacidad de oxidación se detectó por una coloración oscura en los centros o bordes de las colonias que solo se observa en presencia de Mn. En ausencia de Mn las colonias no presentan esta coloración. Los aislamientos que presentaron una alta capacidad de oxidación de Mn fueron identificados utilizando métodos moleculares. Se amplificó por reacción de PCR el gen que codifica por el ARNr 16S utilizando oligonucleótidos universales. Los amplicones de 1500pb obtenidos se secuenciaron y las secuencias resultantes se analizaron mediante la comparación con bases de datos específicas: Ribosomal Database Project y GenBank, las cuales arrojaron resultados idénticos en todos los casos. Además, se realizaron estudios complementarios de Biotyping usando MALDI-TOF para corroborar la identificación previa. Finalmente, se llevaron a cabo análisis filogenéticos moleculares basados en la secuencia del ARNr 16S utilizando el programa PhyML 3.0. Hasta el momento, se identificaron 166 bacterias pertenecientes a distintos géneros, algunos de los cuales aún no han sido asociados a procesos de oxidación de Mn. Dado que la metodología descripta en este trabajo ha permitido aislar e identificar exitosamente nuevos géneros bacterianos involucrados en la oxidación de Mn, estudios futuros contribuirán al entendimiento del rol de la oxidación de Mn(II) en la evolución bacteriana.